目的:肝癌是一种在世界范围内常见的恶性肿瘤,它的发生和发展是一个多基因参与、多步骤完成的复杂过程。MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA,其大小长约20～25个核苷酸。miRNAs对细胞的增殖、侵袭及转移等有重要的调节作用。异常的miRNAs表达与人类某些疾病包括肿瘤的发生发展都密切相关。本实验研究miR-941在肝癌中的表达情况及其对肝癌细胞生物学行为的影响,并确定其下游靶基因及该靶基因对肝癌细胞表型的影响,同时研究了 miR-941在肝癌中低表达可能与其启动子区域的高度甲基化程度有关。为肿瘤的治疗研究提供理论基础和治疗靶位。方法:首先应用实时定量PCR技术检测miR-941在人肝癌组织和癌旁正常组织中的差异表达,同时检测了 miR-941在六种肝癌细胞中与正常肝细胞的差异表达,然后在两种人肝癌细胞系QGY-7703和HepG2细胞系中,过表达及封闭miR-941后,利用MTT实验,细胞集落形成实验,Transwell迁移和侵袭实验检测miR-941对肝癌细胞生长,迁移及侵袭能力的影响,之后综合利用生物信息学方法预测了 miR-941的候选靶基因,并通过荧光报告载体实验,real-time PCR和免疫荧光技术验证这一预测。在确定靶基因之后又利用RNA干扰技术将靶基因的表达沉默后,通过MTT实验和细胞集落形成及迁移和侵袭实验进一步研究靶基因的功能。最后,我们通过软件预测了 niR-941上游CpG岛并通过亚硫酸氢盐测序的方法确定在肝癌细胞中miR-941 上游甲基化程度,研究miR-941在肝癌中低表达与甲基化的关系。结果:miR-941在肝癌组织及肝癌细胞中表达明显下调,过表达miR-941可以降低肝癌细胞的增殖,迁移及侵袭能力。利用生物信息学预测KDM6B(Lysine(K)-specificdemethylase6B)为miR-941的候选靶基因,荧光报告载体实验,Real-time PCR实验及免疫荧光实验证实miR-941能够通过作用于KDM6B的3’非翻译区的特定位点,对其表达在转录后进行负性调节。干扰KDM6B后同样也能抑制肝癌细胞的增殖,迁移和侵袭能力,与过表达miR-941的作用相一致。同时,外源性的增加细胞内KDM6B的水平,可以有效的挽救由过表达miR-941引起的细胞生长表型的变化。亚硫酸氢盐测序证明miR-941启动子区域在肝癌细胞中存在高度甲基化,从而引起miR-941的表观遗传性沉默。结论:miR-941由于其上游启动子区域高甲基化从而导致其在肝癌中低表达,过表达miR-941可以直接调控靶基因KDM6B的表达水平而抑制肝癌细胞增殖,迁移及侵袭能力,起到抑癌基因的作用。