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目的:研究败酱科(Valerianaceae)缬草属(Valeriana Linn)植物蜘蛛香(Valeriana jatamansi Jones)提取物对人结肠癌SW480细胞的增殖抑制和抗转移作用。方法:以总黄酮为指标,通过正交法筛选蜘蛛香超声提取的最佳工艺,通过大孔吸附树脂纯化除杂得到所需蜘蛛香提取物。采用紫外分光光度法测定蜘蛛香提取物中总黄酮的含量,采用HPLC测定其橙皮苷、槲皮素、芹菜素的含量。通过MTT法、细胞脱落实验、病理观察、流式细胞仪检测观察蜘蛛香提取物和橙皮苷、芹菜素对结肠癌SW480细胞的增殖抑制、促进凋亡等作用;通过划痕实验、同质性粘附实验观察其抗结肠癌SW480细胞转移作用。结果:以总黄酮为指标,经正交实验筛选,确定蜘蛛香超声提取最佳工艺为65%乙醇、20倍量提取20分钟、提取3次。采用紫外分光光度法进行样品总黄酮含量测定,计算得蜘蛛香中总黄酮含量为2.27%,经大孔吸附树脂处理后浸膏中总黄酮含量为3.47%。采用高效液相色谱法测定样品中橙皮苷、槲皮素和芹菜素含量,计算得蜘蛛香中橙皮苷含量为0.34%,槲皮素含量较低,无法测出,芹菜素含量为0.0009%;经大孔吸附树脂处理后样品中橙皮苷含量为2.99%,槲皮素含量为0.04%,芹菜素含量为0.05%。应用MTT法检测蜘蛛香大孔树脂提取物、橙皮苷、芹菜素和5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用,实验结果表明:在作用24h后,各组药物在实验剂量下均能有效抑制SW480细胞的增殖,蜘蛛香提取物组、橙皮苷组、芹菜素组与5-FU组比较无显著性差异。细胞脱落实验进一步表明,与空白对照组相比,各药物组均能增强细胞的脱落率,抑制细胞的增殖,具有极显著性差异(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,各药物组给药24h后,与空白对照组相比,均能显著提高肿瘤细胞的凋亡率(P<0.01);且蜘蛛香提取物组和橙皮苷组G0/G1期细胞数明显降低,而S期和G2/M期细胞百分比与空白对照组相比均有明显增加。病理观察显示,光镜下各组细胞均表现出肿瘤细胞的特征,如细胞形状不规则、核大、核浆比例大、多核仁等。其中空白对照组少见有凋亡形态的细胞出现,而各用药组均可见有细胞凋亡的典型形态学变化出现,如细胞体积缩小、变圆,细胞膜完整,细胞核固缩、染色质凝聚深染。划痕实验表明,蜘蛛香提取物和芹菜素均能显著降低结肠癌SW480细胞的移动能力(P<0.05),其中芹菜素的效果最强。对SW480细胞同质性粘附率的影响,各组药物之间没有明显差异。结论:经正交实验筛选,蜘蛛香超声提取最佳工艺为65%乙醇、20倍量提取20分钟、提取3次。进一步经大孔吸附树脂纯化除杂得到的蜘蛛香提取物中,总黄酮、橙皮苷、芹菜素和槲皮素的含量显著增加,含量分别为3.47%、2.99%、0.04%和0.05%。蜘蛛香提取物和橙皮苷、芹菜素能够显著抑制结肠癌SW480细胞的增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞于S期和G2M期,对其移动能力也有明显的影响,表明物蜘蛛香提取物及其有效成分对人结肠癌SW480细胞有明显的增殖抑制和抗转移作用。