桐粕脂溶性粗毒素测定方法的建立及初步应用

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桐粕是一种较好的蛋白质资源,在我国蕴藏量非常丰富,充分开发利用这一蛋白质资源具有十分重要的意义。近年来,人们开展了大量的桐粕开发研究工作,并取得了较好的成绩,特别是在脱毒方法、脱毒工艺、毒素提取、毒素成分分离、桐粕营养价值的评定以及桐粕作为蛋白饲料原料在畜牧生产上的应用等方面取得了突破性的进展。但是迄今为止,桐粕毒素成分仍不清楚,桐粕毒素的测定方法未见报道,这就妨碍了桐粕在畜牧生产中的广泛应用。本研究在已有研究的基础上,对桐粕脂溶性粗毒素进行了研究,建立了桐粕脂溶性粗毒素测定方法,应用此方法对不同脱毒处理的脱毒效果和不同产地的桐粕毒素的残留水平进行了检测和比较,并对脱毒桐粕安全性评价进行了初步探讨。 本研究发现,用乙醇溶液对桐粕进行脱毒,然后用乙酸乙酯萃取脱毒溶液所得到的桐粕脂溶性粗毒素具有紫外吸收特征,在270nm处有最大的紫外吸收,并且桐粕脂溶性粗毒素的浓度(Y)与其吸光度(X)之间存在显著的线性相关关系,回归方程为:Y=28.109X+2.4533 R2=O.9993。在270nm处用紫外分光光度计测得桐粕脂溶性粗毒素溶液的吸光度,根据此回归方程和桐粕脂溶性粗毒素稀释到测定浓度时总体积就可以求得桐粕脱出脂溶性粗毒素量,计算公式为:m=4(28.109A+2.4533)×10-2(g)。用此方法对四个不同脂溶性粗毒素水平的桐粕脱出脂溶性粗毒素量进行测定,与实测值比较,相对偏差小于5%。这证明了此方法可用于桐粕脂溶性粗毒素的检测,而且有较高的准确性。 运用桐粕脂溶性粗毒素测定方法,研究不同处理的脱毒效果,结果表明不同处理脱毒效果不同:(1) 不同脱毒时间,脱毒效果不同。时间越长,脱毒效果越好,每延长48小时,脱毒效果提高约10%;(2) 不同脱毒溶剂浓度的脱毒效果也不一样。浓度越高,脱毒效果越好,75%乙醇溶液和95%乙醇溶液的脱毒效果分别约为50%乙醇溶液的脱毒效果的2倍和3倍;(3) 不同温度,脱毒效果不同。温度越高,脱毒效果越好,但温度升高,脱毒效果增加不显著;(4) 在温度32℃,湿度40%的条件下自然发酵24小时,桐 粕中脂溶性毒素含量降低 10儿-运用此方法对来自湖南慈利县、永顺县、洪江市三植物油厂的桐粕进行检测,桐粕 毒素残留水平存在差异。来自永顺植物油厂桐粕的毒素残留水平最低,来自洪江植物油 厂的桐粕的毒素残留水平最高。 建立的桐粕脂溶性粗毒素测定方法对脱毒桐粕的安全性评价进行了初步探讨。用小 白鼠饲养试验和急性毒性试验证明脱毒桐粕的安全性,然后应用桐粕脂溶性粗毒素测定 方法对其进行检测。初步研究表明:当100g脱毒桐粕在室温25C下用75%乙醇溶液脱 毒48 ’J\时,然后用乙酸乙酯革取得到的桐粕脂溶性粗毒素在270urn处测得脱毒溶液吸 光度小于0.329,脱出桐粕脂溶性粗毒素量小于0.4689时,脱毒桐粕就较安全。 桐粕脂溶性粗毒素测定方法的建立,为生产中选择较好的桐粕的脱毒方法、脱毒工 艺和评价脱毒桐粕安全性提供了理论依据。
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