目的:随着医疗技术的发展,二代靶向测序方法可临床用于丙酮酸激酶缺乏症（Pyruvate kinase deficiency,PKD）的基因诊断（尤其是常规溶血检查不能确诊的病例）,我们收治了1例贫血新生儿,基因检测出PKLR基因突变,确诊为丙酮酸激酶缺乏症。方法:患儿其母孕38+3周于我院产科剖宫产娩出。患儿生后反应差,全身皮肤黏膜苍白,重度贫血貌,皮肤无黄染及皮疹,双肺呼吸音粗,未闻及干、湿性啰音,心率140次/分,律齐,心音低钝,心前区可闻及心脏杂音,腹平软,肝肋下约3cm,质韧,剑突下约2cm,质韧,脾肋下约3cm,质稍硬,新生儿原始反射欠完善。血常规示:白细胞计数69.10×109/L,中性粒细胞百分比24.10%,淋巴细胞百分比43.50%,红细胞计数1.21×1012/L,血红蛋白47g/L,红细胞压积18.0%,血小板计数82×109/L。经输血治疗后,多次复查血红蛋白波动于90-161g/L。病原学检查示:巨细胞病毒Ig G阳性,Ig M阴性,余均为阴性;EB病毒、单纯疱疹病毒、巨细胞病毒DNA示:均为阴性;血培养示:未见细菌生长;结核感染T细胞检测（T-spot）:阴性。抗人球蛋白试验示:阴性;DIC示:未见明显异常;先天性代谢病筛查示:甘油和N-乙酰酪氨酸增高;溶贫九项示:阴性;骨髓穿刺示:骨髓象可见原、幼淋巴细胞伴缺铁表现。结果:患儿于生后9月龄行基因检查（上海新培晶医学检验所）示:PKLR（Pyruvate Kinase,Liver And RBC）基因存在二处杂合性改变（N M₀00298:exon6:c.941T>C:p.1314T,NM₀00298:exon6:c.848T>C:p.V283A）,其中遗传自母亲的变异在人群中有一定发病率。其可致丙酮酸激酶缺乏症,呈常染色体隐性遗传特征。结论:PKD导致的遗传性非球形红细胞溶血性贫血的诊断标准如下:（1）PKD导致的溶血主要发生在血管外,故应明确查看是否具有贫血、黄疸和脾肿大等慢性溶血性疾病的临床表现;（2）若在病史采集时显示有新生儿溶血性贫血史、不明原因的先天性非球形红细胞溶血性贫血史,或在妊娠、感染等情况下贫血症状加重等,常提示红细胞酶病;（3）外周血红细胞呈小棘球形红细胞,有时红细胞的渗透脆性会增加,酸化甘油溶血试验也会发生异常。随着医疗诊断技术的发展,PKD可通过检测PK活性和测定PKRL基因的外显子及启动子系列等明确诊断。