稻壳黄酮类化合物的提取、精制及抗氧化活性研究

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本文首先以稻壳为原料详细研究了提取分离黄酮类化合物的方法与条件,建立了最佳提取与纯化工艺,然后初步鉴定了黄酮类化合物的结构类型,最后对稻壳黄酮提取物的抗氧化活性进行了研究,这些都为稻壳黄酮在保健食品和中药开发与应用中奠定了良好的基础。首先采用醇提取法,研究稻壳中黄酮类化合物的提取工艺。在提取过程中,通过单因素试验考察了浸提溶剂浓度、浸提温度、浸提时间、料液比和浸提次数等5个主要因素对稻壳中黄酮类化合物提取效率的影响。在单因素的基础上,通过正交试验L9(34),得到最佳提取条件为乙醇浓度50%,浸提温度70℃,浸提时间6h,料液比1:30,浸提次数3次。此前,先通过不同显色方法以及它们的紫外光谱特征,发现利用紫外吸收光谱测定稻壳中黄酮含量宜采用AlCl3法(λmax=275nm)。然后对稻壳乙醇提取液中黄酮的纯化进行了研究,通过五种大孔吸附树脂对稻壳黄酮的吸附和解吸性能的比较,筛选出最适合精制稻壳黄酮的大孔吸附树脂为AB-8树脂,并通过单因素与正交试验确定了其吸附与解吸的最佳条件。此外,还考察了动态吸附泄漏曲线和动态解吸曲线,确定了合适的上样液与洗脱液体积。按最佳吸附和解吸条件,经AB-8树脂富集后,稻壳提取液黄酮纯度提高了3.09倍,达到了富集、分离的目的。通过黄酮类化合物与特殊试剂的颜色反应和稻壳黄酮类化合物的PPC、TLC、UV、IR、HPLC等谱图特征判断其基本结构,结果表明稻壳黄酮提取物的主要成分是一种具有5,7和4’-OH的C-糖苷黄酮类化合物。最后在抗氧化性实验中,通过不同浓度的Vc、BHT(2,6-二叔丁基对-甲酚)和稻壳黄酮乙醇溶液的还原能力比较、对二苯代苦味酰自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-)、羟自由基(·OH)的清除能力比较、以及在卵黄脂蛋白、猪油等不同体系中抗脂质过氧化的能力比较。实验表明:稻壳黄酮对DPPH·、O2-、·OH都具有较强的清除能力,其清除能力随着溶液浓度的增大而增大;稻壳黄酮对多不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系有很强的抑制作用,这种抑制作用也随着反应体系中溶液浓度的增大而增强;从抑制猪油氧化实验可以看出,稻壳中黄酮提取物具有较强的抗脂质过氧化的能力。
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