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目的1．观察肺气虚证模型大鼠的尿量、尿比重、血中内皮素、白细胞介素1-β及肿瘤坏死因子-α含量变化。补充和完善肺气虚证模型大鼠的客观指标。2．观察肺气虚证模型大鼠肺、肾组织AQP1、AQP2、AQP4表达的变化，为机体在水液代谢过程中，“肾主水”，肺主“通调水道”等肺肾相关理论提供实验依据。3．观察肺气虚证模型大鼠血中内皮素、白细胞介素1-β及肿瘤坏死因子-α水平的变化，及其与肺、肾组织AQP1、AQP2、AQP4表达的关系，探讨肺气虚证模型大鼠影响肺肾组织AQP1、AQP2、AQP4表达的机制，为中医学在水液代谢过程中“肺肾相关”的基本理论提供客观依据。方法1．健康Wistar大鼠20只随机分为模型组和对照组，用2次气管内注入脂多糖及熏香烟4周的复合刺激法建立肺气虚证大鼠模型，观察大鼠的行为学改变，体重改变；造模第28天测量大鼠24小时尿量，采用折射计法测定尿比重；4周后测定血中ET、IL-1β和TNF-α含量并通过HE染色来观察其病理形态学改变。2．应用免疫组化、Western blot方法测定肺、肾组织AQP1、AQP2、AQP4蛋白表达的变化，应用RT-PCR方法测定肺、肾组织AQP1、AQP2、AQP4mRNA表达变化。3．应用放射免疫方法测定血中、肺组织匀浆中ET、IL-1β及TNF-α含量，与肺气虚证模型大鼠肺、肾组织AQP1、AQP2、AQP4作相关性分析，判断它们之间的关系。4．统计学处理采用SPSS10.0统计软件分析，实验数据均采用“(?)±s”表示，组间比较采用t检验。相关分析采用correlate中的简单相关分析方法。结果1．动物造模对各项指标的影响造模过程中模型组大鼠先后出现咳嗽、气急、喘鸣、鼻部潮湿微红，精神萎靡、行动迟缓、蜷伏不动、毛失光泽并有脱落等症状，食量逐渐减少，大便变软变稀。同时模型组体重增幅和对照组相比有进行性减少趋势，第14、28d模型组体重与对照组比较有显著性差异(P＜0.01)；模型组体重增长远不及对照组。模型组大鼠尿量明显减少，尿比重增加，与对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。模型组大鼠血浆中ET含量增高，与对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。血清中IL-1β与TNF-α的测量结果显示模型组均有升高，与对照组比较有显著性差异(P＜0.01)。模型组肺组织肉眼及光镜所见符合慢性支气管炎、肺气肿性病理变化，局部肺泡腔内可见水肿液。2．肺气虚证模型大鼠肺、肾组织AQPs的表达肺组织AQP1主要表达在肺泡周围和支气管周围毛细血管内皮细胞，与对照组比较模型组AQP1蛋白表达明显减弱，AQP1mRNA表达下降(P＜0.01)；肾组织AQP1主要表达在肾单位的近端小管和髓袢降支细段上皮细胞的顶质膜与基侧质膜，模型组AQP1蛋白表达明显强于对照组，AQP1mRNA表达增高，与对照组比较有显著差异(P＜0.01)。肺组织AQP2表达阴性；肾组织AQP2主要表达在肾内髓集合管主细胞的顶质膜与胞浆内囊泡中，模型组AQP2蛋白阳性表达明显强于对照组，AQP2mRNA表达增高，与对照组比较有显著差异(P＜0.01)。肺组织AQP4主要表达在气道上皮细胞的基质膜，即气管、支气管上皮细胞内，模型组肺组织AQP4蛋白表达升高，AQP4mRNA表达增高，与对照组比较有显著差异(P＜0.01)；肾组织AQP4主要表达在内髓集合管近端2／3处的集合管主细胞的基质侧，模型组AQP4蛋白表达弱于对照组，AQP4mRNA表达下降，与对照组比较有显著差异(P＜0.01)。3．肺气虚证模型大鼠肺组织中ET、IL-1β、TNF-α含量的变化肺气虚证模型大鼠肺组织中ET、IL-1β、TNF-α含量与对照组比较均明显升高，统计学分析显示两组间肺组织中ET、TL-1β、TNF-α含量有显著性差异(P＜0.01)。4．血中ET、IL-1β、TNF-α含量与肺、肾组织AQPs表达的相关性分析肺气虚证模型大鼠血中ET、IL-1β、TNF-α含量与肾组织AQP1、AQP2、AQP4及与肺组织AQP1、AQP4相关性分析结果显示：肺气虚证模型大鼠血中ET、IL-1β、TNF-α含量与肾组织AQP1、AQP2、肺组织AQP4表达呈正相关，与肾组织AQP4和肺组织AQP1表达成负相关。说明肺气虚证模型大鼠血中ET、IL-1β、TNF-α含量增高可以上调肾组织AQP1、AQP2和肺组织AQP4表达，下调肾组织AQP4、肺组织AQP1表达。肺气虚证模型大鼠血中ET、IL-1β、TNF-α含量之间相关性分析结果显示：肺气虚证模型大鼠血中ET与IL-1β、TNF-α含量相关性0.01＜P＜0.05，而IL-1β、TNF-α两者之间相关性分析P＜0.01，说明ET、IL-1β、TNF-α三者之间的任意一种物质含量增高，均可促进其它两者分泌增多，而IL-1β、TNF-α关系更密切。结论1．肺气虚证模型大鼠尿量明显减少，尿比重明显增加。2．肺气虚证模型大鼠肺组织AQP1表达下调、AQP4表达上调；肾组织AQP1、AQP2表达上调，而AQP4表达下调。3．肺气虚证模型大鼠血中及肺组织中ET、IL-1β、TNF-α含量明显升高。4．血中ET、IL-1β、TNF-α含量升高可作为肺气虚证模型大鼠的客观指标。5．在机体水液代谢过程中，“肺肾相关”的物质性之一，可能是肺、肾组织某些AQPs的反向表达。6．在水液代谢过程中肺的“宣发、肃降”的物质基础，可能与肺脏释放的ET、IL-1β和TNF-α等活性物质有关。