金蝉花纯培养深层液体发酵工艺的研究

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金蝉花是中国传统中草药中一种及其珍贵的药用可食用真菌。研究表明,金蝉花与冬虫夏草中的营养成分类似,其中部分成分含量甚至高于冬虫夏草。由于冬虫夏草产量稀少且近几年相关部门检测出冬虫夏草中砷含量超标,导致金蝉花作为冬虫夏草的替代品在虫草市场中的地位逐年上升,其营养价值与临床应用方面逐渐被人们认可。深层液体发酵是金蝉花实现工业化大规模生产的新方向,为金蝉花有效活性物质的提取、研究与利用提供了新的途径。本文中利用的金蝉花菌种是从江苏省竹林区采集的野生金蝉花经过筛选得到的JCH-1,利用摇瓶与发酵罐对金蝉花进行深层液体发酵,为后期工业化生产提供理论依据及参考。本文的主要研究内容与研究结果如下:(1)探究金蝉花菌种的生理特性,并对金蝉花深层液体发酵工艺进行探讨与研究。(2)对金蝉花摇瓶培养条件进行优化实验确定了最佳接种量是5%、最佳培养温度为22℃、最佳装液量为10%(300mL/3000mL)、最佳摇床转速为90r/min,自然pH值,最佳培养时间为6-7d并且绘制出金蝉花菌种JCH-01的生长曲线。利用PDA蔗糖培养基在最佳培养条件下对金蝉花进行深层液体发酵获得金蝉花菌丝体干重为21.1g/L。(3)对金蝉花深层液体发酵培养基的各成分组成及含量进行优化,优化得到的培养基为添加5%葡萄糖、0.5%蛋白胨、1%酵母粉、0.1%的了 FeS04 · 7H20与0.1%ZnSO4 · 7H2O。利用有优化后的培养基进行发酵,获得金蝉花菌丝体干重为29.8g/L。(4)对金蝉花有氧深层纯培养30L自动控制发酵罐发酵工艺进行研究,根据摇瓶实验确定的培养基配方及培养条件对30L发酵罐进行实验,获得金蝉花菌丝体干重为32.2g/L。和摇瓶实验比较,中试水平发酵周期短,菌丝体干重提高了 8.05%,取得了理想的结果,适合工业化大生产。(5)本文按照虫草制品中腺苷的测定方对金蝉花深层液体发酵得到的菌丝体(摇瓶和30L发酵罐)进行有效成分含量的测定,测量结果为摇瓶培养得到的菌丝体中腺苷含量为0.0377%,发酵罐发酵得到的菌丝体中腺苷含量为0.0396%。
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