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目的：观察三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对局灶性脑缺血大鼠模型梗死后14d和28d的Nogo-A/NgR及下游Rho激酶信号通路上关键分子Nogo-A、NgR1、 NgR2、RhoA、ROCK Ⅱ的nRNA和蛋白表达的影响以及对反应神经元突触传递效能的SYP和PSD-95蛋白表达的影响,探索三七总皂苷对神经缺血性损伤后的神经重塑与突触重建的作用机制。方法：将雄性健康SD大鼠分为假手术组和手术组、Y27632组、PNS加Y27632组,对除假手术组外所有动物建立大脑中动脉阻塞模型(Middle cerebral artery occlusion, MCAO),再将手术组随机分为模型组、PNS组、尼莫地平组,每组均为7只动物。每天上午称量动物体重并对神经功能进行评分并记录下来。MCAO术后14d和28d,在冰上取出脑组织,利用RT-PCR检测mRNA表达含量,Western Blot检测蛋白表达含量,HE观察病理变化、免疫组织化学方法观察Nogo-A、NgR1、NgR2、RhoA、ROCKⅡ的 mRNA和蛋白表达、SYP和PSD-95蛋白表达以及对神经元形态结构的影响。结果：1在14d和28d的观察期内,所有进行了手术的动物体重均低于未做手术的假手术组动物体重(P<0.01)。MCAO术后14d,Y27632和PNS+Y27632组体重较模型组明显增长(P<0.05,P<0.01),尼莫地平组体重增长低于PNS+Y27632组(P<0.05)。MCAO术后第28天,各经药物治疗组动物的体重均较模型组明显增长(P<0.05,P<0.01)其中Y27632和PNS+Y27632组增长明显与PNS组比较有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。2在脑组织缺血梗死后28天的观察期内,假手术组的动物都没有神经功能损伤,各经过手术的动物神经功能评分高于假手术组(P<0.01)。MCAO术后第14天,Y27632组和PNS+Y27632组评分低于模型组(P<0.05)。术后第28天,PNS+Y27632组动物的神经功能评分低于模型组的评分(P<0.05)。3造模后的第14天和28天,假手术组动物的大脑皮层中的Nogo-A蛋白和mRNA表达均最低,模型组的mRNA和蛋白表达明显高于假手术组(P<0.05,P<0.01),PNS组动物大脑皮层中的Nogo-A蛋白表达也较假手术组高(P<0.05,P<0.01),同时PNS组表达比模型组低(P<0.05)。在MCAO术后14d,Y27632组、PNS+Y27632组、尼莫地平组的Nogo-A蛋白表达均比模型组低(P<0.01),PNS+Y27632组、尼莫地平组比PNS组表达还低(P<0.05),各用药组Nogo-A mRNA表达水平均较模型组明显下降(P<0.05,P<0.01),但其中PNS组和Y27632组表达仍较假手术组高(P<0.05)。在MCAO术后的第28天,尼莫地平组和PNS组的Nogo-A蛋白表达与假手术组动物相比较高(P<0.05),但比模型组低(P<0.05),Y27632和PNS+Y27632组的表达低于模型组(P<0.05,P<0.01),除了PNS组之外所有经过治疗组的Nogo-A mRNA表达均较模型组明显下降(P<0.05)4在造模后的第14天和28天,与假手术组比较,模型组的NgR1的蛋白和mRNA表达均升高(P<0.01)。在MCAO术后第14天,与假手术组比较,PNS组和Y27632组NgRl的蛋白表达较高,Y27632组和尼莫地平组的mRNA表达也较高(P<0.05),PNS+Y27632组和尼莫地平组与模型组蛋白表达相比明显降低(P<0.01),其中尼莫地平组比PNS组降低更多(P<0.01), PNS+Y27632组和PNS组的mRNA较模型组下降(P<0.05)。CAO术后第28天,各用药组NgR1的蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01),PNS组、PNS+Y27632组和尼莫地平组mRNA表达表达下降明显(P<0.05,P<0.01),其中PNS+Y27632组蛋白表达降低最明显,并且低于PNS组(P<0.05)。5在造模后的第14天,PNS+Y27632组的NgR2蛋白表达最低且与除了尼莫地平组之外所有组比较有统计学意义(P<0.05,P<0.01),尼莫地平组NgR2蛋白表达较模型组低(P<0.01),模型组的NgR2 mRNA表达高于假手术组(P<0.05),尼莫地平组的mRNA表达低于模型组(P<0.05)。MCAO术后第28天,模型组NgR2蛋白表达较假手术组显著升高(P<0.01),各用药组的NgR2蛋白表达较模型组表达下降(P<0.01)尼莫地平和PNS组较PNS+Y27632组蛋白表达较高(P<0.05),模型组的NgR2 mRNA表达高于假手术组(P<0.05)。6在造模后的第14天和28天,模型组大鼠皮层RhoA蛋白和mRNA表达与假手术组相比均显著上升(P<0.05,P<0.01)。在MCAO术后14d中,各用药组表达较模型组降低(P<0.05,P<0.01),其中尼莫地平组的RhoA蛋白表达较高与假手术组相比还有显著差异(P<0.05),同时也低于模型组的表达(P<0.05)且显著高于Y27632组的表达(P<0.05),各用药组中除PNS组外的mRNA表达均低于模型组(P<0.05)。MCAO术后28d,在各用药组中除了尼莫地平组外,各组RhoA蛋白表达均低于模型组(P<0.05,P<0.01),各用药组的RhoA mRNA表达均降低(P<0.01)。7在造模后的第14天和28天,模型组皮层ROCK Ⅱ蛋白和mRNA表达显著升高且与假手术大鼠比较具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在MCAO术后第14天,各用药组大鼠皮层的ROCK Ⅱ蛋白表达与模型组相比均显著下降(P<0.01),除尼莫地平组外的各用药组的ROCK Ⅱ mRNA表达与模型组相比均显著下降(P<0.06)。在MCAO术后28d,各用药组除尼莫地平组外大鼠皮层的ROCK Ⅱ蛋白和mRNA表达较模型组比减少(P<0.05,P<0.01),其中尼莫地平组蛋白和mRNA表达稍高,较Y27632组有统计学意义(P<0.05)。8在造模后的第14天和28天,假手术组的神经元结构完整,Nogo-A、NgR1、RhoA、 ROCK Ⅱ、SYP和PSD-95蛋白的免疫阳性物质均匀分布在细胞膜、细胞质或突触间隙中,可以明显看到神经元胞体和轴突,其阳性蛋白的表达量与模型组比较具有统计学意义(P<0.01)。模型组的梗死周围区的细胞结构大部分消失,越靠近梗死中心区的部位其筛网状表现更明显,且蛋白的免疫阳性物质多以圆形的颗粒状存在,已经观察不到其在轴突的分布。Nogo-A、NgR1、RhoA、ROCKⅡ蛋白的免疫阳性物质表达多于假手术组(P<0.01)。在MCAO术后第14天和28天的观察中均发现,模型组大鼠SYP蛋白表达比假手术组减少(P<0.01)。在MCAO术后第14天可以观察到PNS、Y27632、 PNS+Y27632组的SYP蛋白表达较模型组有明显增多(P<0.05),各用药组的PSD-95蛋白免疫阳性物质多于模型组(P<0.05,P<0.01)。MCAO术后28d,在各用药组中均可观察到SYP和PSD-95蛋白表达的增多(P<0.05,P<0.01)。结论：1脑梗死后神经功能的恢复十分困难,在MCAO术后14d和28d的观察期PNS并未能完全治愈神经功能的损伤,但发现PNS和Y27632均有促进神经功能恢复的作用,并且二者对促进神经功能恢复可能有加和作用,PNS在28d的观察期内始终具有促进神经功能恢复的作用,而随着14d之后时间的延长Y27632的这种作用似乎有降低。2 PNS具有抑制Nogo-A,NgR1, NgR2, RhoA, ROCK Ⅱ蛋白和mRNA表达的作用,PNS的这种抑制作用与ROCK的特异性抑制剂Y27632类似,可认为PNS可能通过抑制Nogo-A/NgR1及下游的Rho/ROCKⅡ信号通路上的关键分子的表达而发挥对缺血性脑梗死后神经元的重塑和保护作用。经过对缺血性脑梗死后28d较长恢复期的观察发现,PNS和Y27632的联合应用可使其对轴突再生和重塑的作用更加稳定。3 PNS通过对Nogo-A/NgR1及下游的Rho/ROCKⅡ信号通路的抑制作用,提高了梗死灶周围区SYP和PSD-95蛋白的免疫阳性物质的表达,改善了缺血性损伤后大脑皮层梗死周围区的神经元的结构和功能,激发了梗死后轴突的再生和突触的重塑。