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四倍体刺槐具有速生、叶大、条粗、枝密的特点,并具有一定的抗旱、耐烟尘、耐盐碱、耐瘠薄、抗风沙和固氮能力,是改良土壤、水土保持、防风固沙、四旁绿化、荒山造林的首选树种。饲料型四倍体刺槐叶子含有较高的营养成分,为优质的木本饲料。据报道四倍体刺槐在我国西部地区引种已初获成功。近几年来,我国从国外引进的四倍体刺槐新品种或无性系数量有限,用扦插、嫁接等方法繁殖速度慢、育苗效率低、不能满足生产需要,严重阻碍这一优良材料的推广应用。用组织培养法繁殖苗木,大大提高繁殖系数,用组培苗建立采穗圃,可以加速四倍体刺槐的良种繁育,满足林业生产对种条的需要。 关于四倍体刺槐的组织培养仅见个别的简要报道。为此,本文以建立四倍体刺槐组织培养快速繁殖体系为目标对其进行了较为系统深入的研究。供试材料为宽叶饲料型四倍体刺槐两个无性系Gigns type locust(1)(简称K3)、Gigns type locust(2)(简称K4)(以下同),由陕西省苗木繁育中心提供,该中心于1998年引自北京林业大学,系1997年从韩国山林厅林木育种研究所引进我国。对四倍体刺槐组织培养研究结果表明: 1.初代培养以茎段为最佳外植体;在器官发生途径中,幼叶和带形成层的韧皮部为最佳外植体。茎段外植体最佳消毒方式为:用70%酒精浸润30s,然后用0.1%HgCL2消毒8-10min,无菌水清洗5次。 2.MS培养基为基本培养基,茎段启动培养最佳培养基及激素组合为:MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。分化增殖培养过程中,四倍体刺槐无性系k3和K4嫩梢生长最佳激素组合分别为:BA0.5mg/L、NAA0.1 mg/L、KT0.5 mg/L和KT1.0 mg/L、NAA0.5 mg/L、BA0.5 mg/L,四倍体刺槐无性系k3和K4丛生芽数最佳激素组合分别为:BA0.5mg/L、KT0.5 mg/L、NAA0.1 mg/L和BA0.5 mg/L、KT1.0 mg/L、RAA0.5 mg/L。 3.无性系K3、K4愈伤组织诱导培养基及激素组合分别为Ms附加BA0.3 mg/L、2,4-D0.5 mg/L和BA0.3 mg/L、2.4-D1.0 mg/L。k4叶片和韧皮部愈伤组织分化率最佳激素组合分别为KT0.6 mg/L、BA1.0 mg/L、NAA0.1 mg/I、和KT0.6 mg/L、BA1.0 mg/L、NAA0.5 mg/L。K3叶片、韧皮部愈伤组织分化率最佳激素组合分别为KT0.6mg/L+BA0.5mg/L+NAA0.1 mg/L和BA1.0 mg/L+KT0.6 mg/L+NAA0.5 mg/l;K3叶片、韧皮部愈伤组织丛生芽数最佳激素组合为KT0.4mg/L+NAA0.1mg/L+BA0.5mg/L;k4叶片、韧皮部愈伤组织丛生芽数最佳激素组合为KT0.6 mg/L+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L; 4.试管苗最佳生根培养基及激素组合为1/2MS+IBA0.25 mg/L,平均生根条数为8条。瓶内生根试管苗培养40天左右,苗高达3—4cm,叶色深绿,根粗壮时可出瓶移栽。移栽成活率9月份最高,移栽的最佳基质为腐殖土,移栽时加盖玻璃罩提高成活率。 5.培养基其他物质对培养效果影响的初步研究结果表明,附加 AgNO户0mg/L可以增加分化的丛生芽数 5E个,附加 GA30.3mg/L可以促进丛生芽的伸长生长。 6.对完全木质化的老茎采用削芽带木质部的芽体进行接种可以增加丛生芽数,此种接种方式至今未见报道。 7.对不同激素组合过氧化物酶同工酶谱的研究结果表明,K3、K4两个无性系在酶带的数量和活性上均不相同,总体上看,K4一级酶带数 15条,占总酶带数的 46%;K3一级酶带数 6条,占总酶带的 19%。较高浓度的NAA和 2,4—D有利于愈伤组织的诱导,其中2,4—D效果最好。 8.四倍体刺槐的叶轴可以诱导出丛生芽,一般为2-3个芽。至今尚未见此种外植体诱导出丛生芽的报道。