甜樱桃砧木吉塞拉高效组培快繁技术优化

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甜樱桃(Prunus avium L.)也称大樱桃、欧洲樱桃,为我国北方落叶果树中果实成熟最早的果树树种之一,其果实具有极高的营养价值及经济价值。吉塞拉系列(Gisela)为人工种间培育的三倍体杂种樱桃砧木,具有矮化、嫁接亲和力强、抗病性强等优良性状。国内外虽然已有关于吉塞拉系列砧木无性繁殖的相关研究,但通过改变光质来改善继代培养组培苗生长状况以及以培育袋代替常用的组培瓶作为培养容器的研究相对较少。同时,在初代污染率、继代培养中玻璃化等问题仍需解决。因此,建立吉塞拉砧木高效组培快繁技术体系对满足商业化大量生产的需求十分必要。本研究在前人研究的基础上开展了优化吉塞拉系列砧木高效组培快速繁殖体系的研究工作,在初代培养中通过选择适宜的外植体降低污染率,在继代培养中筛选出最适宜吉塞拉增殖分化的培养基琼脂浓度、蔗糖浓度、植物激素种类及配比以及最适LED光质,在生根培养中对比袋装生根和传统瓶内生根的差异,并筛选出诱导吉塞拉生根的最适NAA浓度,为促进樱桃产业发展提供了一定的理论基础和技术支撑。主要结果如下:(1)进行继代培养时,最适培养基及激素配比应为:MS+6.2 g/L琼脂+30g/L蔗糖+1.0 mg/L 6-BA,p H为5.7。(2)当琼脂浓度为6.2 g/L时,组培苗长势良好、叶片舒展且大小适中,颜色浓绿,且组培苗平均高度及增殖系数较高,分别为2.39 cm和3.08;琼脂浓度低于6.2 g/L时,易发生玻璃化现象;琼脂浓度高于6.2 g/L时,叶片易发生枯黄现象。(3)当蔗糖浓度为30 g/L时,组培苗长势良好,丛生芽茂盛、植株挺拔,叶片舒展且大小适中、颜色翠绿,且组培苗的平均高度和增殖系数均为最高,分别为2.53 cm和5.0;当蔗糖浓度高于30 g/L时易发生玻璃化现象,达到40 g/L时组培苗出现发黄老化现象。(4)最适宜的培养基应以6-BA为唯一外源激素,浓度为1.0 mg/L。当6-BA浓度为1.0 mg/L时,丛生芽生长旺盛,叶片较大且舒展,叶片颜色较深,且吉塞拉组培苗的平均高度和增殖系数较高,分比为2.01 cm和4.13。在培养基中添加IBA后,吉塞拉组培苗的长势弱于以6-BA为唯一外源激素的组培苗,有玻璃化现象发生,且叶片褶皱、面积减小,叶片颜色较浅。(5)本试验设置FL(荧光灯对照)、R(LED灯红光)、W(LED灯白光)、2R1B(LED灯红光蓝光比值2:1)、1R2W(LED灯红光白光比值1:2)、1R7W(LED灯红光白光比值1:7)、Y(LED全光谱)等七种不同光质。适宜的红白光比例培养下可促进吉塞拉继代增殖,其中光质为1R2W时组培苗增殖效果显著,吉塞拉5号、6号和12号增殖系数分别为10.25、9.00和6.33,红蓝光无明显促进作用,即1R2W>1R7W>Y>R>W>2R1B>FL。不同光质处理下吉塞拉5号、12号组培苗生长高度差异性显著,吉塞拉6号无显著差异。光质为Y时对组培苗高度伸长的促进作用显著,吉塞拉5号、6号和12号的平均高度分别为1.91 cm、1.54 cm和1.63 cm;红光/白光比值越高,组培苗生长高度越高,W对吉塞拉组培苗高度伸长无促进作用,吉塞拉5号、6号和12号的平均高度仅为1.47 cm、1.55 cm和1.11 cm,即Y>R>1R2W>1R7W>2R1B>FL>W,但R光质下组培苗叶片易枯黄。因此,光质为1R2W最适宜吉塞拉组培苗增殖,其次为LED全光谱。(6)生根培养适宜的NAA浓度为0.2-0.3 mg/L。当NAA浓度为0.3 mg/L时,吉塞拉组培苗普遍生根率最高;而当NAA浓度为0.2 mg/L时,吉塞拉组培苗生根长度较长且柔软,移栽苗的成活率较高。当NAA激素浓度为0.1 mg/L时,吉塞拉组培苗生根数量较少,且生根长度短。(7)袋装生根培养相对瓶内生根培养的组培苗生根率降低,需留出充足的空间供组培苗生长发育。当NAA激素浓度为0.2 mg/L时,袋装生根率最高,为22.22%,与浓度为0.3 mg/L时生根率差异不显著,当NAA激素浓度为0.1 mg/L时生根率最低,仅为10.00%,且与浓度为0.2 mg/L和0.3 mg/L的组培苗生根率间差异显著。
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