本课题研究脐血贴壁细胞（ACs），特别是间充质干细胞（MSC）的生物学特性，探索脐血造血微环境特征。同时研究通过骨髓腔内途径（iBM）移植脐血单个核细胞（MNC）到NOD／SCID小鼠体内，观察脐血细胞的造血重建能力，为临床UCBT提供新的移植方法。 第一部分 取足月妊娠健康产妇胎儿新鲜脐血分离脐血单个核细胞（MNC），体外用含血清的低糖型DMEM培养基培养。对ACs形态动态观察：间充质干细胞（MSC）生长曲线、细胞周期、细胞表面表型分析、体外诱导分化实验以及检测其细胞因子的表达等。少部分脐血MNC来源ACs与典型MSC类似，形态为长梭状，类似于成纤维细胞，90％以上细胞处于Go／G₁期，可以传至30代以上而无形态学变化。此类细胞表达CD₁₃、CD₂₉、CD₄₄、CD₁₀₅等黏附分子，而不表达CD₁₄、CD₃₁、CD₃₄、CD₁₀₆等。这些MSC细胞在一定的诱导分化剂的作用下可向成骨和脂肪细胞分化，并表达IL-6、SCF和SDF-1等细胞因子。大部分脐血MNC来源ACs形态上类似于巨噬细胞，不能传代，弱表达CD₁₄和CD₃₁，仅有IL-6的表达，没有MSC的生物学特征。 第二部分 采用骨髓腔内移植（iBM）的方法移植脐血单个核细胞（MNC）到NOD／SCID小鼠的下肢胫骨骨髓腔中，观察这种方法对小鼠造血重建和免疫功能恢复的影响。NOD／SCID小鼠预先经¹³⁷Cs全身照射后，在4h内无菌条件下局麻后从尾静脉或骨髓腔内输注分离脐血MNC。受体小鼠24只随机分为5组：对照组4只，骨髓腔内输注培养液；阳性对照组（iTV）5只，尾静脉输注脐血MNCs 3×10⁷／只；实验组（iBM-1）5只，骨髓腔内输注脐血MNCs 3×10⁶／只；实验组（iBM-2）5只，骨髓腔内输注脐血MNCs 1×10⁷／只：实验组（iBM-3）5只，骨髓腔内输注脐血MNCs