谷胱甘肽对储存期内血小板活化及参数的影响

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目的:为研究临床输注血小板的安全性和有效性,征得30名献血者同意后,将30名献血者随机分为两组,I组为添加谷胱甘肽作为干扰保存的实验组(GSH组),II组为常规保存血小板的对照组(常规组),对每一组血小板进行0-5d的保存。观察储存期间血小板的CD62p表达和血小板各个参数间的变化,为临床输注血小板提供安全﹑有效的参考依据。方法:I组中每份样本添加含有5ml的谷胱甘肽溶液,血小板样本(222)℃体外震荡存放0-5天,每天进行检测,流式细胞仪检测CD62p阳性表达率,PHS-3C精密PH计检测PH值;LH750全自动血细胞分析仪及配套试剂检测血小板计数;QX-200血小板聚集仪、ATP荧光检测仪测定聚集、释放试验数据;奥林巴斯电子显微镜观察细胞形态变化。常规组或实验组0-5d保存观察得出的数值进行组内比较,然后两组检测参数进行组间比较(常规组与GSH组的CD62p阳性表达率及四个检测指标在保存期内每天检测的数值进行对比)。统计学处理采用重复测量方差分析的方法。结果:第I组结果(GSH组):GSH组的血小板随着保存时间的延长,0-3d后结果显示:CD62p阳性表达率(%)数值呈缓慢上升趋势,差值变化不大,差异无统计学意义(P>0.05);3-5d后结果显示:CD62p阳性表达率(%)数值亦呈缓慢上升趋势,差值变化不大,差异无统计学意义(P>0.05);PH值、血小板计数的数值变化平稳,聚集和释放试验的数值变化呈平稳递增趋势,数值变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05);形态学观察:偶见少量血小板聚集,血小板基本保持圆形,差异无统计学意义(P>0.05)。第II组结果(常规组):常规组的血小板保存0-3d后,CD62p阳性表达率(%)结果提示数值呈上升趋势,差值变化不大,差异无统计学意义(P>0.05)(见表1);PH值、血小板计数指标数值趋于稳定,聚集和释放的数值变化亦不大,差异无统计学意义(P>0.05)(见表2),形态学上观察未见明显异常(见图I示),差异无统计学意义(P>0.05)。3d-5d后,CD62p阳性表达率(%)结果提示数值呈大幅度增长;其各项数值基本上呈递减或递增趋势,变化显著,差异有统计学意义(P<0.05);形态学观察:可见两个或三个血小板聚集,紧密相连,多数血小板呈圆形,只有个别充满空泡,血小板性质没有变化,差异有统计学意义(P<0.05),即临床治疗用血时建议输注3d内保存期的血小板,这样能够得到较好的治疗效果。I组、II组结果比较:检测参数进行组间比较(GSH组与常规组的CD62p阳性表达率及四个检测指标在保存期内每天检测的数值进行配对比较),第3d-5d保存期内数值变化明显,差异有统计学意义(P<0.01);形态学观察:两组0-5d保存时间内观察结果无显著差别,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血小板在保存期间会发生一定程度的活化和血小板形态、功能的改变,GSH可有效抑制血小板的活化,为提高临床输注安全性和有效性,建议1)血小板保存液中添加谷胱甘肽(GSH)。2)输注储存期3d内的血小板效果会比较好。
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