麦穗鱼染色体显带技术及DNA含量研究

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麦穗鱼(Pseudorasbora parva),又叫罗汉鱼、小草鱼,属鲤形目、鲤科、鮈亚科、麦穗鱼属,是一种分布广泛的淡水小型鱼类,生长速度快,繁殖能力强,容易养殖,对化学物质较为敏感,具有开发为水环境监测鱼种的潜能。为了了解麦穗鱼的染色体特征和DNA含量,了解其遗传背景和分类地位,为培育其作为水环境监测鱼种提供细胞遗传学资料,本文主要对麦穗鱼的染色体核型、Ag-NORs显带、C-显带、各组织DNA含量及细胞周期进行了研究。本文主要研究结果如下:1.麦穗鱼染色体核型分析实验采用了2种方法制备麦穗鱼染色体:一为采取PHA和秋水仙素活体注射、肾细胞短期培养和空气干燥制片法制备;二为采用组织块培养法,对麦穗鱼鳍条组织细胞进行短期培养,然后采用空气干燥制片法制备染色体,2种方法均取得了良好的结果。通过对肾细胞和鳍条细胞中期分裂相统计得知,麦穗鱼的染色体数目为2n=50,核型公式为18m+22sm+10st,染色体臂数(NF)为90;此外,染色体上未观察到次缢痕和随体结构,也未发现有异型性染色体。2.穗鱼染色体Ag-NORs带研究采用PHA和秋水仙素活体注射、肾细胞短期培养和空气干燥制片法制备麦穗鱼染色体,然后进行银染技术处理。统计银染后的间期核和中期分裂相可知,麦穗鱼的染色体可能具有1对Ag-NORs,位于第23对染色体短臂末端,其NORs具有多态性,同源染色体上的NORs大小有一定差异,未见Ag-NORs联合现象。3.麦穗鱼染色体C-带研究采用PHA和秋水仙素活体注射、肾细胞短期培养和空气干燥制片法制备麦穗鱼染色体,然后进行C-显带技术处理。经C-显带技术处理后,观察染色结果可知,麦穗鱼的染色体C-显带阳性区域主要存在于染色体的端粒和着丝点区域,少数C-显带阳性区域位于染色体居间区域,其中第23对染色体的短臂大部分呈现C-带强阳性。4.麦穗鱼DNA含量研究利用流式细胞仪对麦穗鱼的血液、肌肉、鳍条、鳃、肝脏、肾脏和性腺7种组织的DNA含量进行了测定。结果表明,麦穗鱼的血液、肌肉、鳍条、鳃、肝脏、肾脏和性腺7种不同组织的DNA含量存在不同程度的差异,几种组织DNA含量大小从大到小排序依次为:肌肉、血液、鳍条、肝脏、性腺、肾脏、鳃,肌肉的DNA含量最高,达到3.20±0.07pg,肾脏和鳃组织的DNA含量最低,仅为3.05±0.08pg,以血液的DNA含量作为麦穗鱼二倍体细胞的DNA含量,为3.17±0.10pg。5.麦穗鱼不同组织细胞周期采用流式细胞仪对麦穗鱼的血液、鳃、肝脏、肾脏和性腺5种不同组织的细胞周期进行了检测。检测结果表明,麦穗鱼的血液和其它4种组织一样都表现出了一定的细胞周期现象,性腺和肝脏组织的Go/G1期时相的比例较低,细胞增殖指数比较高,分别为17.81%和13.19%,鳃组织细胞增殖指数最低,仅为6.54%,同时几种组织的细胞周期时相也存在着不同的差异。
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