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目的:本研究应用microRNA技术,构建卡氏肺孢子菌( Pneumocystis carinii , PC )主要表面糖蛋白( Major surface glycoprotein,MSG)表达调控基因上游保守序列(Upstream conserved sequence,UCS)的microRNA表达载体。方法:设计并人工合成针对PC MSG-UCS基因microRNA序列并定向克隆到microRNA表达载体pcDNA?6.2-GW/EmGFPmiR上,采用双酶切凝胶电泳与基因测序法鉴定重组载体pPC-UCSm。结果:双酶切凝胶电泳和基因测序鉴定pPC-UCSm得到的产物与预期目的基因一致。结论:成功构建和鉴定卡氏肺孢子菌MSG-UCS基因的microRNA表达载体pPC-UCSm。