目的：细胞凋亡，有时称为细胞自杀或程序性细胞死亡(PCD)，是一种高度调控的细胞死亡方式，它具有特定的形态学和生物化学特征，是细胞主动地运用基因调控程序引起自身死亡。目前认为细胞凋亡是生物学中一种非常关键的调控过程，正是这种细胞死亡过程，可使多细胞有机体清除损伤的、衰老的、转化的、畸变的、或无用的细胞，而不引起(或只是极轻微的)机体微环境损伤和炎症。凋亡对细胞有丝分裂或细胞增殖起互补但相反的作用，它对维持组织内环境的稳定、细胞群体动力学平衡、胚胎发育及成人组织、器官、个体的各种生理功能和病理反应等足必不可少的。最近的研究表明，凋亡调控的紊乱与人类许多疾病的发病机理有关，如凋亡受抑与癌症、自身免疫性疾病及持续性病毒感染有关；凋亡过度则是爱滋病、神经退行性疾病、局部缺血性损伤及毒素诱发的器官特异性疾病的发病机理之一。凋亡可由多种生理性应激或病理性损伤等凋亡刺激诱导，这些凋亡信号汇聚于一共同的由效应分子(凋亡酶)、接头分子(Apaf-1)和调节分子(Bc1-2家族促／抗凋亡成员、凋亡抑制蛋白IAPs及凋亡酶活化物Smac／DIABLO)组成的凋亡共同通路。在这个精巧而有序的系统中，线粒体是细胞死亡机器的汇聚体，当接受不同来源的多种凋亡刺激时，其外膜通透性增加，向胞浆释放可激活下游凋亡效应器的I 中文摘要：关键分子如细胞色素ckyto c）和Smaco。一旦凋亡酶被激 活，它们将裂解蛋白质底物分子，导致DNA凝聚、断裂和胞膜出芽等 细胞凋亡的形态学改变。许多信号转导通路如蛋白酪氨酸激酶 （Protein Tyros。ne Kinases，PTKs），类固醇受体，车经酚胺，磷 酸肌醇，细胞因子受体自身及与CD95吓as，Apol）和TNF受体的 胞内死亡结构域uD）相互作用的蛋白如 FADD，RIP及TRADD都参与 细胞增殖与凋亡过程的调节。在与绍胞凋亡、增殖及细胞周期调节有 关的信号转导通路中，蛋白磷酸化调节是一最基本也是最普遍的机 制。细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平是由蛋白酪氨酸激酶oTKS）和专 一水解蛋白磷酸－酪氨酸残基上的磷酸根基团的蛋白酪氨酸磷酸酶 （Protein Tyros。ne PhosDhatases，PTPases）两者的活性共同决 定的。许多研究表明，象PTKs一样，PTPases可参与诸如细胞增殖， 分化，凋亡，细胞周期进程，新附及迁移的信号转导并发挥调控效应。 尽管对PTKS在这些细胞过程中所起的作用及涉及的细胞及分子机制 的研究已取得巨大进展，但对PTPases在细胞增殖、凋亡及细胞周期 进程方面所起的作用及机理还知之甚少，不同作者的研究结论也不一 致甚至相互矛盾。目前还不能确定PTPases在细胞增箔、凋亡及细胞 周期进程方面是仅仅是起一个与PTKS完全相反的作用还是其某些效 应相同或重叠，澄清这一问题具有理论与实际意义，因为PTKS抑制 剂己经在临床上被成功地用来治疗如慢性髓细胞性白血病的血液肿 瘤，另一方面新近发现一种被称为PTEN川 汀、位于染色体 10q23．3的新的磷酸酶在人类肿瘤中是一新的抑癌基因，此基因的杂 2 中文摘要 合性缺失或突变参与上皮性肿瘤，多型性神经胶质瘤，淋巴瘤及白血 病的发生。研究 PTPases功能的方法包括基因敲除（gene knockout） 或定点突变失活，天然抑制性配体及化学性抑制剂的应用等。正矾酸 钠（Sod。urn orthovanadate，Na。VO。），一种细胞膜可通透性的化学 性酪氨酸磷酸酶抑制剂，它的应用有助于PTPases胞内信号传导通路 的研究。己有NasVO；对细胞增殖及凋亡研究的多篇报道，但结论并不 一致，在 Raj i淋巴瘤细胞增殖、凋亡及细胞周期分布中的作用及机 理的研究尚未见报道。为了探讨酪氨酸磷酸酶uTPases）通路在淋 巴瘤细胞增殖、细胞周期进程及凋亡中的作用及机制，研究了正矾酸 钠州a。VO。）对来源于伯基特淋巴瘤并高表达膜受体型PTPaseuD45） 和 Be 12的 Raj i淋巴瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期状态的影响及作 用机制，以期探讨它在淋巴瘤的治疗中是否具有潜在临床应用价值。 方法：1．Raj i细胞培养 Na人O。，储存液浓度 100mM，实验前 用不含血清的 RPMI 640培养液稀释至工作液浓度，实验用终浓度为 卜 100 v M，细胞培养起始时加入，持续作用至培养结束u4刁2小 时）；观察对线粒体膜 电位臼影响时，＊＊。＊O川Z用时 ＊ 为4小时。责