实时剪切波弹性成像对乳鼠脑功能影响的研究

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:A58400794
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目的:剪切波弹性成像技术是目前弹性成像领域的前沿技术,其临床应用范围正在迅速的不断扩大。目前剪切波弹性成像技术已开始应用于新生儿颅脑疾病的诊断,有研究证实该技术具有一定临床诊断价值。但生长发育过程中的中枢神经系统对外界刺激存在敏感性,若这一过程受到干扰,将会给生物体带来严重的后果。因而该技术应用于新生儿颅脑检查是否在安全范围仍有待考证,国内外尚无研究对此进行报道。本课题以新生小鼠为实验对象,首次研究剪切波弹性成像颅脑检查技术对新生哺乳动物脑组织及脑功能的影响,研究内容主要包括以下两个方面:1.采用剪切波弹性成像仪对新生C57乳鼠进行不同时长的照射,并在照射后24小时取脑,观察脑组织形态学变化及信号通路相关蛋白在脑组织中的表达;2.将经过不同时长照射的C57乳鼠饲养至3个月,使用Morris水迷宫检测小鼠的认知功能,并在水迷宫实验后断头取脑,观察脑组织形态学变化及相关蛋白的表达情况。方法:第一部分:将225只出生24小时的新生乳鼠随机分为五组:对照组,5分钟组,10分钟组,20分钟组和30分钟组,并根据相应分组对乳鼠进行不同时长的剪切波弹性成像仪的照射。在接受照射后24小时,每组取10只乳鼠断头取脑,观察脑组织形态学变化和信号通路相关蛋白的表达情况。第二部分:将剩余小鼠饲养至3个月,每组随机挑选15只雄性小鼠,利用Morris水迷宫对小鼠的空间学习记忆能力进行检测,观察并统计逃避潜伏期、穿台次数及目标象限停留时间等指标,并在水迷宫实验24小时内将小鼠断头取脑,观察脑组织形态学变化及信号通路相关蛋白在脑组织中的表达情况。结果:第一部分:根据HE染色和NissI染色的结果,对照组,5分钟组,10分钟组,20分钟组和30分钟组的乳鼠脑组织均未发现明显病理变化。Western-blot检测的结果显示,10分钟,20分钟和30分钟组乳鼠脑组织中的p-PKCa蛋白水平减低,30分钟组乳鼠脑组织中的p-mTOR和p-AKT蛋白水平减低。第二部分:根据Morris水迷宫的实验结果,对照组,5分钟组,10分钟组,20分钟组和30分钟组的小鼠之间逃避潜伏期、穿台次数及目标象限停留时间等指标的差异均无统计学意义。将小鼠断头取脑后,根据HE染色和Nissl染色的结果,各组小鼠脑组织均未发现明显病理改变;Western-blot检测的结果显示,各组小鼠之间脑组织相关通路蛋白的表达水平无明显差异。结论:利用剪切波弹性成像仪对新生乳鼠持续照射30分钟,虽不会引起乳鼠脑组织形态学的改变,但当照射时间持续10分钟时,脑组织中p-PKCa蛋白水平表达减低;持续30分钟时,脑组织中P13K/AKT/mTOR信号通路会受到影响。这种改变随着小鼠的长大会逐渐得到修复,且其空间学习记忆能力与对照组小鼠相比无明显差异,但仍提示生长发育过程中的中枢神经系统对声辐射力脉冲刺激存在敏感性,在利用剪切波弹性成像仪对新生儿颅脑进行检测时,应避免长时间照射。
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