天麻多糖分离纯化及其抗氧化活性研究

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天麻(Gastrodia el Bl.)是中国医学传统的名贵药材,具有镇静催眠、促智抗衰老、抗氧化等作用。多糖是天然的高分子化合物,参与并维持了生命的多种生理功能。本论文试验旨在对天麻多糖的分离纯化和性质活性方面做初步的摸索,为今后天麻多糖的利用和开发提供一定的依据。试验以天麻为研究对象,对天麻多糖的提取、分离纯化、抗氧化活性进行了研究。研究结果如下:1.以单因素试验为基础,利用响应面优化法对水提多糖工艺进行了优化。不同因素对于多糖提取率的影响程度为:液料比>提取时间>提取温度,确定了优化的多糖提取工艺参数:液料比为51(mL/g)、提取温度为78℃、提取时间为65min,在此条件下天麻多糖得率为6.23%。2.天麻粗多糖经过除蛋白、脱色、透析后,经过纤维素DE-52得到了水洗脱和0.1mol/LNaCl洗脱两个部分,再分别经凝胶G-100进一步纯化,得到了PRG1~PRG5五个分子量均一的天麻多糖,分子量分别为:19251Da(9mg)、3920Da(118mg)、32646Da(11mg)、24786Da(21mg)和17142Da(32mg);红外光谱扫描结果表明PRG1~PRG5均有多糖特征吸收,糖苷键均为α-构型;紫外扫描结果表明天麻多糖PRG1和PRG5不含核酸和蛋白,PRG2~PRG4含有微量蛋白;天麻多糖PRG1~PRG5的比旋光度分别为50.133、73.592、75.117、62.811、131.491°;单糖分析结果表明:PRG1由果糖和葡萄糖组成,果糖与葡糖糖的摩尔比为1:10.682;PRG2由葡萄糖组成;PRG3由果糖和葡萄糖组成,果糖与葡糖糖的摩尔比为1:1.542;PRG5由葡萄糖脱水缩合而成;天麻多糖PRG1~PRG4为白色粉末,PRG5为淡黄色粉末。4.天麻多糖PRG1~PRG5对于DPPH·和羟自由基(OH)有一定清除能力,对DPPH·的清除能力较好。PRG1~PRG5清除DPPH·自由基的IC50值分别为4.52、3.94、7.01、5.67和4.78mg/mL,且随着浓度的增加,在一定的范围内,呈现出良好的量效关系。总体上来看:通过响应面法确立了天麻多糖的最佳提取工艺条件,经分离纯化后得到了不同分子量的均一天麻多糖,为后面的结构解析、构效关系研究提供了一定的依据。
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