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吉林延龄草(Trillium kamtschaticum)为百合科延龄草属(Trillium)植物,其根茎可作为中药材“头项一颗珠”,用于月经不调、崩漏、外伤出血、跌打损伤等症,在土家族、苗族等少数名族地区被奉为神药而广泛应用。前期对吉林延龄草全草70%乙醇粗提物进行体外诱导兔血小板聚集活性研究,发现给药浓度为1.5 mg/ml时最大聚集率能达75%,具有非常显著的止血活性。为了阐明其止血活性成分,本论文开展了吉林延龄草的化学成分和生物活性研究。 论文分三章。第一章综述了延龄草属植物的化学成分和生物活性研究进展。目前从延龄草属植物中分离报道了79个化合物,主要为甾体皂苷类化合物。对该属植物活性的研究主要集中于其提取物在抗肿瘤、神经性疾病、抗炎、免疫等方面,单体化合物的活性研究报道甚少。该综述为开展吉林延龄草化学成分及生物活性的深入研究提供了依据。 第二章详述了对吉林延龄草(T.kamtschaticum)全草70%乙醇提取物化学成分和生物活性研究。采用大孔吸附树脂、硅胶层析柱、反相Rp-18、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)和HPLC等多种材料和分离手段,结合NMR、MS、UV、IR等现代波谱技术和化学方法,从止血活性部位和非活性部位共分离鉴定了52个化合物,其中42个为甾体皂苷类,包括18个新的甾体皂苷。这些新甾体皂苷的糖基主要由葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖及芹糖组成,苷元结构呈现多样性,可分为六种类型:3个首次从自然界中分离具有4,5位双键的△4,5-17-OH类型的异位偏诺皂苷(1-3);2个B环为五元环且醛基取代的丫蕊花皂苷元皂苷(4和5);5个不同程度氧化的多羟基甾体皂苷(6,7,10-12);3个具有不同程度乙酰化的18位降碳的延龄草皂苷衍生物(24-26);3个胆甾烷,包括1个E环为苯环的类胆甾烷苷(32),1个罕见的C-23与C-16通过羟醛缩合而形成6/6/6/5/5环系的胆甾烷皂苷(35),1个脱氢克里托皂苷(36);2个孕甾烷,包括1个首次从自然界分离得到苷元为16-oxaandrost-5-en-17-one的C18甾体二糖苷(40),还有1个苷元为Pregna-5,17(20)-diene-20-carboxylic acid methyl ester的二糖苷(41)。对从活性部位分离所得的15个主要偏诺皂苷及其衍生物及从非活性部位分离得到的2个延龄草皂苷进行了血小板聚集活性筛选,结果表明给药浓度为300μg/ml时,该植物中主要偏诺皂苷类化合物19,21和23体外诱导兔血小板聚集的最大聚集率(Maximal Platelet Aggregation Rate,MPAR)分别为72%,71%和62%。此外,评价了37个化合物对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌的抗菌活性,结果表明化合物8,9,20,21和23均对白色念珠菌表现出较强的抑制活性,其MIC值在7.8-1.6μg/mL之间,对其它菌株的抑制作用较弱。 第三章对吉林延龄草化学成分及生物活性的研究结果进行分析总结。化学成分方面:首先对该种具有多样性甾体皂苷进行生源途径的推测;另外分析了脱氢克里托皂苷作为众多甾体皂苷前体的可能性。生物活性方面,根据筛选结果探讨了偏诺皂苷诱导血小板聚集活性的初步构效关系:苷元的C-27位为甲基,5,6位为双键,以及B环为六元环,是活性必需基团,而且糖链至少含两个糖基及以上;此外,单糖的类型、糖基的长度和连接方式也影响止血活性。