黄曲霉毒素（Aflatoxin）是一种由黄曲霉菌（Aspergillus flavus）和寄生曲霉菌（Aspergillus parasiticus）产生的对人和家畜危害极大的真菌毒素。该毒素具有强烈的致癌作用,其中又以黄曲霉毒素B₁（Aflatoxin B₁,AFB₁）危害最大。研究发现许多蛋白参与了黄曲霉毒素B₁对机体的致癌过程,其中包括TCA循环中的异柠檬酸脱氢酶3ɑ亚基。在AFB₁导致的致癌过程中,该亚基的表达水平增加。本实验通过克隆获得idh3ɑ基因,然后在大肠杆菌中表达IDH3ɑ蛋白,将其免疫小鼠,得到抗IDH3ɑ的多克隆抗体。利用甲醇/水溶液配合超声萃取法从黄曲霉菌株中提取黄曲霉毒素B₁。将黄曲霉毒素B1用于注射小鼠和处理Chang Liver细胞,然后利用得到的抗体检测处理的小鼠肝脏及细胞内的IDH3ɑ表达水平。构建过表达载体pCDNA3.1（-）-idh3ɑ、RNA干扰载体pGPU6/GFP/neo-shRNA,脂质体转染哺乳动物细胞,G418筛选获得稳定表达细胞株,并分别通过Q-PCR和Western Blot进行验证。本实验获得以下结果（1）获得的多克隆抗体效价达到16,000。（2）提取的毒素经ELISA检测浓度达到100.7μg/mL。（3）黄曲霉毒素B₁处理的小鼠和细胞内IDH3ɑ水平都出现了升高。（3）对转染过表达载体和RNA干扰载体的细胞,进行的Q-PCR、Western Blot检测结果表明,IDH3ɑ在mRNA水平和蛋白水平,均分别发生了升高或下调,这充分证明IDH3ɑ过表达和干扰细胞模型建立成功,为下一步信号通路的研究提供了条件。