论文部分内容阅读
【目的】：观察漆姑草提取物（SJE）对人白血病细胞株HL-60的增殖抑制及诱导凋亡作用，探讨其可能作用的分子机制，为漆姑草的研究开发和白血病的治疗提供新的途径。 【方法】：水提法和醇提法分别提取漆姑草的有效成分；四甲基偶氮唑蓝 MTT法分别检测SJWE和SJAE在促人白血病细胞HL-60凋亡中的作用；流式细胞术检测SJAE在促人白血病细胞HL-60凋亡中的作用；hoechst33258染色法检测SJAE在促人白血病细胞HL-60凋亡中的作用；用JC-1荧光染色法检测SJAE作用人白血病细胞HL-6048h后其线粒体膜电位的变化情况；用western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9蛋白的表达情况。 【结果】： （1）MTT法结果显示，SJAE作用HL-60细胞后，效果不稳定，其结果不具有统计学意义；SJAE作用人于白血病HL-60细胞48h后，IC50为20.17μg/ml，其能够抑制HL-60细胞的增殖，呈浓度依赖性。 （2）流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法结果显示，SJAE能够诱导人白血病细胞 HL-60发生凋亡，其早期凋亡率与药物浓度呈现浓度依赖性。药物浓度为4μg/ml，20μg/ml，100μg/ml时的早期凋亡率分别为（6.42±0.04）％、（9.76±0.06）%、（11.23±0.02）%，与对照组比较，具有统计学意义（P＜0.05)。（3）hoechst33258染色法结果显示，SJAE作用人白血病HL-60细胞48h后，出现凋亡图片，对照组细胞核形态规则且染色均匀，而处理组死亡细胞胞核固缩，可见浓染致密的颗粒状荧光及典型的凋亡小体；药物浓度为4μg/ml，20μg/ml，100μg/ml时，凋亡率分别为（10.06±0.13）%、（29.34±0.72）%、（33.09±0.75）%，与对照组相比，具有统计学意义（P＜0.05)。 （4）JC-1染色法结果显示，SJAE作用人白血病HL-60细胞48h后，出现细胞线粒体膜电位下降变化的图片。 （5）Western blot结果显示，与对照组对比，实验组HL-60细胞中的caspase-3、caspase-9的蛋白表达水平增高，Bcl-2/Bax比率降低，差异具有统计学意义（（P＜0.05)。 【结论】：SJAE对HL-60细胞有抑制增殖的作用；其具有一定诱导人白血病HL-60细胞凋亡的功效；作用HL-60细胞后，caspase-3和caspase-9蛋白表达水平增高，Bcl-2/Bax比率降低。