【摘 要】
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目的:高迁移率族蛋白B1（High mobility group box-1 protein,HMGB1）是一种进化古老的蛋白质,其作为机体细胞内的一种重要的非组蛋白染色体结合蛋白,参与多种重要的生物学过程,包括DNA修复、基因转录、细胞炎症反应、自噬等。本研究以一次性大负荷离心运动为干预手段,观察运动后不同时相骨骼肌自噬情况,探讨HMGB1作为自噬调节因子对大负荷运动后骨骼肌自噬的影响及分子机制
【基金项目】
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国家自然科学基金（31471133）; 北京体育大学自主课题（2019PT013）
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目的:高迁移率族蛋白B1（High mobility group box-1 protein,HMGB1）是一种进化古老的蛋白质,其作为机体细胞内的一种重要的非组蛋白染色体结合蛋白,参与多种重要的生物学过程,包括DNA修复、基因转录、细胞炎症反应、自噬等。本研究以一次性大负荷离心运动为干预手段,观察运动后不同时相骨骼肌自噬情况,探讨HMGB1作为自噬调节因子对大负荷运动后骨骼肌自噬的影响及分子机制。方法:选取48只雄性8周龄SD大鼠,随机分成对照组（C）和运动组（E）,E组进行一次性大负荷离心运动。根据运动后不同的取材时间将运动组分为运动后即刻组（E0）、运动后12h组（E12）、运动后24h组（E24）、运动后48h组（E48）、运动后72h组（E72）,每组8只。干预结束后根据相应取材时间点取大鼠比目鱼肌进行检测。使用透射电镜观察各组骨骼肌超微结构变化;使用Western Blot方法检测骨骼肌HMGB1、Beclin1、LC3的蛋白表达;通过免疫荧光双染技术检测Beclin1/Bcl-2、Beclin1/HMGB1、Beclin1/Vps34的共定位情况。结果:（1）大负荷离心运动后骨骼肌超微结构发生异常变化,肌节缩短,M线模糊甚至消失,Z带扭曲甚至断裂,出现较多自噬体。（2）一次性大负荷运动后72小时内,骨骼肌自噬相关蛋白Beclin1、LC3II/LC3I和HMGB1蛋白表达出现先增高后降低的趋势;运动后24h,骨骼肌中Beclin1蛋白表达及LC3II/LC3I明显高于安静对照组（P<0.05,P<0.01）,运动后24h与运动后48h核HMGB1蛋白含量明显高于安静对照组（P<0.01,P<0.05）。（3）Beclin1/Bcl-2的共定位在运动后明显增加,呈先升高后降低,再次升高后于运动后72h恢复至安静水平的趋势。Beclin1/HMGB1的共定位在运动后即刻达到峰值,有先升高后降低,再逐渐恢复至安静状态的趋势。Beclin1/Vps34在运动后共定位明显增加,于运动后24h达到峰值,有先升高后降低的趋势,并于运动后72h恢复至安静水平。结论:（1）HMGB1在一次性大负荷离心运动导致的大鼠骨骼肌自噬中可能发挥重要作用。（2）一次性大负荷运动后,HMGB1可能通过促进Beclin1与Bcl-2的分离,促进Beclin1结合Vps34诱导骨骼肌自噬。
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