论文部分内容阅读
目的： 观察黄花乌头(HHWT)有效成分关附甲素(Guanfu base-A，GFA)对离体大鼠血管环舒缩功能的影响，并探讨其舒张血管、修复H2O2损伤内皮的作用机制：在自发性高血压(Spontaneous hypertensive rat，SHR)大鼠高血压形成阶段使用HHWT进行早期干预，在血压上升稳定停药后给予降压药卡托普利进行常规治疗，通过检测各周龄大鼠肠系膜上动脉内皮依赖性舒张度、心肌及肾脏炎症因子，观察黄花乌头早期干预对SHR血管内皮功能及靶器官炎症状态的影响。 方法： 离体血管环实验检测累积浓度的GFA对基础状态、KCl预收缩、苯肾上腺素(Phenylephrine，PE)预收缩的内皮完整或去内皮血管环的作用以及用无钙液处理后对PE的收缩反应；结合3种抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、亚甲蓝(Methyleneblue)和吲哚美辛(Indomethain)，探讨GFA对舒张大鼠离体血管环作用的机制；并且通过H2O2损伤内皮，观察GFA修复H2O2内皮损伤的作用及机理。 对4周龄的SHR进行黄花乌头煎剂提前干预给药至8周龄停药后开始灌胃卡托普利，26周卡托普利停药后观察至34周。颈动脉插管测定大鼠血压及心率；离体血管环实验检测各周龄大鼠肠系膜上动脉内皮依赖性舒张作用；Real-time PCR检测心肌及肾脏的白介素-1(Interleukin-1，IL-1)、肿瘤坏死因子-α(Tumer nerosis factor-α，TNF-α)；Real-time PCR/Western blot检测诱导型一氧化氮合酶(Inducible Nitric Oxide Synthase，iNOS)的mRNA/蛋白的表达。 结果： 累积浓度的GFA(10-8～10-4mol·L-1)对基础状态或KCL预收缩的有无内皮的血管环的张力均无显著影响；对PE预收缩的血管有内皮依赖性舒张作用，与去内皮组相比，GFA从10-7mol·L-1开始有显著差异(P<0.01)。一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝及环氧合酶抑制剂吲哚美辛孵浴后，均能显著抑制GFA的扩血管作用(P<0.01)；经无钙液及GFA预处理后，胸主动脉对PE的反应性均降低(P<0.01)。GFA(10-4mol·L-1)可修复H2O2引起的内皮损伤(P<0.01)，GFA对内皮的保护作用可被L-NAME阻断(P<0.01)。 黄花乌头早期干预可协同卡托普利改善SHR肠系膜上动脉内皮依赖性舒张作用(P<0.05)；经黄花乌头早期干预的卡托普利停药后的降压作用仍然持续(P<0.05)；黄花乌头还可直接抑制心肌及肾脏的TN-α和IL-1的mRNA表达(P<0.01)，并降低SHR的心脏平均周期速率(P<0.05)；黄花乌头早期干预可加强卡托普利降低SHR心肌IL-1、TNF-α、iNOS的表达和3-NT含量及肾脏的IL-1表达(P<0.01或P<0.05)。 结论： GFA对大鼠胸主动脉的降低张力作用主要通过两种途径：内皮依赖性舒张作用的机制主要与NO-GC-cGMP和COX-PGI2-cAMP途径有关；非内皮依赖性抑制收缩机制主要与抑制内钙释放有关；GFA可修复H2O2对胸主动脉造成的内皮损伤，其中一条作用途径为NO-GC-cGMP。黄花乌头具有独立降压以外的对SHR心脏及肾脏的保护作用；在高血压血压上升前用HHWT早期干预有助于延续卡托普利停药后的降压效果及改善SHR肠系膜上动脉内皮依赖性舒张作用，比血压上升稳定后直接给药卡托普利更有利于SHR炎症状态及氧化性损伤的改善。