D-塔格糖是一种在自然界存在极少的功能性己酮糖，可以应用于食品、医药、保健及化妆品等多种领域。本文研究利用微生物酶生物转化D-半乳糖为D-塔格糖，为实现从廉价糖原料到稀少糖的转化奠定基础。　　 1.菌种筛选:实验从土壤中分离出一种可产生L-阿拉伯糖异构酶转化D-半乳糖生产D-塔格糖的嗜热菌株No.6。经菌体及菌落形态、生理生化特性以及16S rDNA进化树分析等方法，将其鉴定为Anoxybacillus flavithermus。实验表明该菌株有一个广泛的生长温度(45-70℃)和pH(5.5-9.5)，最适温度55℃和最适pH为8.5。　　 2.克隆表达:将No.6菌株编码L-阿拉伯糖异构酶的基因片段克隆到E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达。经SDS-PAGE分析检测重组L-阿拉伯糖异构酶蛋白分子量约为56.3kDa，所表达目的蛋白占菌体总蛋白的22.5％。　　 3.蛋白纯化:将诱导好的菌株用超声波细胞破碎仪破碎、4℃离心12000rpm离心10min后收集上清液，80℃热处理10min以去除宿主蛋白，12000rpm离心10min收集上清。由于表达出的蛋白质带有6×His表达标签，可迸一步利用Ni-NTA进行亲和柱层析来提纯表达出的蛋白质。初步纯化结果显示纯酶得率可以达到30mg/L，纯度可达到90％以上，并检测其酶活为26.4 U/mg。　　 4.酶学性质研究:结果表明重组的L-阿拉伯糖异构酶是一个极端嗜热嗜碱的异构酶，最适温度和pH分别为95℃和9.5-10.5;其活性并不依赖金属离子;该酶还对D-半乳糖具有较高的底物特异;转化D-半乳糖的Vmax为454.55μmol/L·min，Km为26.81mM;硼砂可以提高重组酶的催化效率，使kcat/Km提高一倍。　　 5.酶法合成D-塔格糖的研究:该酶在最适温度95℃、pH9.5的硼砂缓冲液中反应1h，D-半乳糖转化生成D-塔格糖的转化率可以达到60％以上。