神经生长因子及其受体在多巴胺激动剂耐受的垂体泌乳素腺瘤中的作用

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第一部分神经生长因子受体(NGFR)在垂体泌乳素腺瘤中的表达及与肿瘤生物学特点的相关性研究目的探讨垂体泌乳素腺瘤中神经生长因子受体及增殖细胞核抗原(PCNA)表达与PRL腺瘤生物学特性之间的相关性。方法应用免疫组化方法检测38例垂体泌乳素腺瘤中两种神经生长因子受体及增殖细胞核抗原的表达情况,并根据肿瘤的生物学特点即侵袭性、多巴胺激动剂敏感性、性别、泌乳素水平、肿瘤大小进行分类。结果P75-NGFR的表达在侵袭性垂体腺瘤、高泌乳素水平,大腺瘤、多巴胺激动剂耐受的垂体腺瘤的表达明显要低于非侵袭性垂体腺瘤、低泌乳素水平,小腺瘤、多巴胺激动剂敏感的垂体腺瘤,而PCNA表达则明显要高,两者在各组中比较均具有显著性差异(p<0.05),而TrkA的表达在各组间没有明显差异;男性垂体泌乳素腺瘤PCNA表达明显要高于女性垂体腺瘤(p<0.05),而P75-NGFR及TrkA的表达在男性与女性垂体泌乳素腺瘤之间没有明显差异。结论P75NGFR的表达水平能间接反映垂体泌乳素腺瘤的增殖活性及对多巴胺受体激动剂的敏感性,P75NGFR有可能是某些腺瘤新的肿瘤生长抑制基因。第二部分神经生长因子(NGF)对GH3细胞增殖活性及细胞周期的影响目的通过观察NGF对GH3细胞增殖及细胞周期及其受体表达的影响,探讨其诱导GH3细胞分化的机制。方法应用MTT法、流式细胞仪、免疫组化法及western blot分别检测不同浓度NGF(10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml和100ng/ml)对GH3细胞增殖的抑制情况、细胞周期的影响及两种多巴胺受体的表达情况。结果不同浓度的NGF作用下均能抑制GH3细胞的增殖,使细胞S期明显减少,G0/G1比例增高,P75NGFR受体的表达明显增高,与对照组相比,差异有显著性,而TrkA受体在对照组中的表达与各实验组比较,无显著性差别。当NGF浓度为50ng/ml时,其抑制增殖效应,P75NGFR受体的表达量最高。结论NGF可诱导GH3细胞分化,降低其增殖活性,S期比例降低,这可能与NGF诱导其P75NGFR受体的表达上调有关。第三部分神经生长因子(NGF)对GH3细胞PRL激素分泌活性及D2受体表达的影响目的通过检测NGF应用后GH3细胞激素分泌活性及D2受体表达的改变,以更深入了解NGF对PRL腺瘤的作用机制。方法应用酶联免疫吸附实验检测了NGF应用前后对GH3细胞PRL激素分泌的改变,通过RT-PCR方法检测了NGF应用前后GH3细胞膜上D2受体的表达。结果单独应用NGF对GH3细胞PRL激素分泌抑制作用较小,联合应用NGF及溴隐停较各单用组对PRL激素分泌抑制作用更加明显,(p<0.05)。结论NGF可增强溴隐停对GH3细胞PRL激素分泌抑制作用,作用机制可能与其诱导GH3细胞多巴胺D2受体的重新表达有关。
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