吸烟大鼠生精细胞凋亡与bcl-2、bax表达的相关性

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目的:探讨吸烟对大鼠生精细胞凋亡和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平的影响,以及生精细胞凋亡与凋亡调控蛋白表达之间的相关性。  方法:用60日龄SD雄性大鼠50只建立被动吸烟大鼠模型,随机分为A组(1枝)、B组(2枝)、C组(4枝)、D组(2枝、戒烟)、E组(0枝),每组10只,均每日两次,每次30min进行染毒,持续4周后处死;D组戒烟后两周再处死。留取睾丸称湿重,常规切片HE染色观察大体结构;应用TUNEL检测睾丸中生精细胞的凋亡,采用免疫组化(S-P法),检测Bcl-2、Bax在大鼠睾丸中的表达情况。  结果:  1.大鼠体重在各组间无明显差异,而大鼠睾丸的重量染毒组明显低于对照组。大鼠睾丸常规切片HE染色显示,对照组睾丸生精上皮中生精细胞排列有序,形态正常;而染毒组生精上皮内生精细胞排列紊乱,生精细胞和精子数量减少,可见较多的多核巨细胞;随着染毒量的增加,生精上皮的厚度有减少的趋势。C组中部分大鼠睾丸曲细精管中的各级生精细胞消失殆尽,表现为唯支持细胞综合症。染毒后戒毒的D组在生精上皮厚度、生精细胞数量及形态结构等方面,均较同剂量的染毒组B组有所改善。  2.对照组存在少量的生精细胞凋亡;染毒组相较于对照组,凋亡细胞数量明显增多,凋亡指数(AI)差异有统计学意义;而在各染毒组间,A、B组凋亡指数大于C、D组,其差异有显著性。C、D组间凋亡指数无显著性差异。  3.免疫组化显示, Bax在染毒组中的表达明显要高于对照组,差异有显著性,且其表达强度与吸烟的枝数呈正相关; Bcl-2在各组间表达存在差异,随染毒剂量增加,表达呈下降趋势,然而差异未发现显著性。  4.统计学相关分析,细胞凋亡指数与Bax的表达强度之间存在着中度正相关关系;与Bcl-2之间则存在着轻度负相关关系。  结论:  1.吸烟可以引起睾丸生精细胞的凋亡以及睾丸体积减低,吸烟剂量越大作用越明显。戒烟有助于生精功能的恢复。  2. Bcl-2表达水平下降而Bax的表达升高,引发大鼠睾丸生精细胞的凋亡增多可能是其中的一种机制或途径。
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