磷酸肌酸钠在大鼠高位脊髓损伤中对心脏的保护作用

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【目的】研究磷酸肌酸钠对高位脊髓损伤所致心肌损伤是否具有保护作用及其可能机制。【方法】健康雄性SD大鼠54只,体重250~300g。随机分为九组,每组6只。假手术对照(TC)组、损伤组(TS):SCI损伤后6h(TS1)、12h(TS2)、24h(TS3)和48h(TS4)和干预组(TL):SCI损伤后6h(TL1)、12h(TL2)、24h(TL3)和48h(TL4)时点向腹腔一次性注射磷酸肌酸钠(200mg/kg),所有动物均在磷酸肌酸钠注射2h后取材送检。从SD大鼠腹主动脉用头皮针穿刺,采集其动脉血2ml,测定肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量等实验室生化酶学指标。剪取SD大鼠右心尖同一部位心肌组织,在蛋白裂解液作用下裂解,提取相关物质使用荧光定量PCR方法测定CasRmRNA表达变化,用Western blot检测心肌组织CaSR蛋白变化。使用透射电镜手段观察心肌细胞的形态学特征。【结果】TS组、TL组各时点血清cTnI和CK、CK-MB含量均高于TC组(P<0.05);TS组cTnI含量在T1时点达到峰值,并在T2、T3、T4时点依次递减, T4时点仍低于假手术组水平(P<0.05);TS组CK含量在T3时点达到峰值,T4时点仍低于假手术组水平(P<0.05);TS组CK-MB含量在T2时点达到峰值,T4时点仍低于假手术组水平(P<0.05);TL组与TS组相比cTnI和CK、CK-MB含量在各个时点均低于TS组同一时点含量(P<0.05)。TS组、TL组CasRmRNA表达量在各时点均高于TC组(P<0.05);TL组各时点CasRmRNA表达量均低于相同时点的TS组CasRmRNA表达量(P<0.05);TS组CasRmRNA表达量在T1、T2、T3时点呈递增趋势,T4时点表达量低于其他各时点但仍高于TC组(P<0.05);TS与TL相比,CasRmRNA表达量在T3时点差异最明显(P<0.05)。TS组、TL组各时点蛋白质表达量均高于TC组(P<0.05);TL组各时点CasR蛋白质表达量均低于TS组相同时点(P<0.05);TS组CasR蛋白质表达量在T1、T2、T3时点呈递增趋势,T4时点含量低于其他各时点但仍高于TC组(P<0.05);TL组各时点可见CasR蛋白质表达量在T3时与TS组相比差异最明显(P<0.05)。透射电镜结果显示TL组各时点大部分心肌细胞细胞核结构、肌节完整,肌丝基本清晰完整;线粒体结构基本正常,无肿胀和空泡样变性,嵴结构基本清晰,心肌损伤情况明显比TS组相应时点轻。【结论】高位脊髓损伤会造成大鼠血清cTnI、CK、CK-MB和心肌组织形态学的损伤表现及CasR高表达,且于48h未能恢复到正常状态。注射磷酸肌酸钠可明显改善高位脊髓损伤所致大鼠血清cTnI、CK、CK-MB及心肌组织形态学方面改变。磷酸肌酸钠可减少高位脊髓损伤大鼠心肌细胞CasR表达,且于24h作用最显著,作用持续至48h。
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