兔血管化自体移植颌下腺细胞凋亡的实验研究

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研究背景:血管化自体颌下腺移植是治疗重症角结膜干燥症的一种有效方法,多数患者术后眼干的症状得到有效缓解。但部分移植腺体于术后1周左右会进入“休眠期”,分泌减少,易导致导管阻塞;而度过“休眠期”的腺体,有一部分出现泪溢或分泌不足,影响治疗效果。血管化自体颌下腺移植首先经历了缺血再灌注的过程,之后则是一个失神经支配的过程。近年来,已有研究表明缺血再灌注损伤及失神经支配与细胞凋亡有密切关系,但是目前对血管化自体移植颌下腺细胞凋亡的相关研究尚未见报道。研究目的:研究血管化自体颌下腺移植术后颌下腺细胞的凋亡。研究方法:建立家兔血管化自体颌下腺移植动物模型,于移植术后1、3、7、30、60、90天取腺体,称重,光镜及透射电镜观察移植腺体组织学形态特征,免疫组化法及蛋白质免疫印迹法检测caspase3的表达。研究结果:1.移植术后第7天腺体重量明显下降,移植术后第30天腺体重量下降至最低点。2.光镜观察可见移植后早期腺体实质部分萎缩样改变。3.电镜观察正常腺体腺细胞锥体形,核椭圆形位基底1/3处,胞浆内充满大小不等的低电子密度分泌颗粒,移植术后第7天腺细胞可见核染色质边聚、凋亡小体形成、细胞膜呈泡状等典型的凋亡特征。4.免疫组化染色可见在移植术后第7天caspase3(p20)表达较对照组明显增加,阳性细胞数量明显增加,阳性细胞呈灶状分布,主要分布于腺泡细胞。5.蛋白质免疫印迹分析可见caspase3(p20)活化片段在移植7天表达较对照组上调79%,p<0.01。研究结论:1.自体移植后家兔颌下腺发生的萎缩,可能是“休眠期”的病理基础。2.血管化自体移植颌下腺早期发生了腺泡细胞凋亡。
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