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目的:通过检测出生前DEHP暴露对成年后大鼠下丘脑前腹侧室旁核(anteroventral periventricular nucleus,AVPV)和视前内侧核(medial preoptic nucleus,MPN)与生殖内分泌调控相关的雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)、Kisspeptin和芳香化酶(aromatase,CYP19)蛋白表达的影响,探讨出生前DEHP暴露对大鼠生殖神经中枢的潜在干扰作用。方法:本研究将32只孕鼠按体重随机分为4个剂量组:玉米油溶剂对照组、2 mg/kg、10 mg/kg和50 mg/kg DEHP剂量组,每组8只孕鼠。按1m L/100g体重的灌胃体积,自大鼠孕14天至孕19天(G14至G19)期间对孕鼠进行灌胃染毒。子代大鼠出生后第一天记为PND0,在PND21断乳时雌、雄大鼠分笼饲养。饲养至成年时(PND70),每窝随机选取1只子代大鼠(每组雌、雄各8只),4%多聚甲醛心脏灌流固定,取包含有下丘脑的脑组织用振动切片机切为40μm厚的脑切片。根据大鼠脑立体定位图谱,确定下丘脑AVPV核区和MPN核区的位置,每只大鼠挑选相同层面的一张脑切片用于检测。脑切片采用免疫荧光组织化学法检测下丘脑AVPV核区和MPN核区ERα、Kisspeptin和CYP19的蛋白表达水平。采用激光共聚焦显微镜对脑切片进行分层扫描,每张脑切片以1μm为间隔扫描10张图像进行分析。采用Image J 1.46r软件对图像进行处理,计算每张图像的光密度值后,用SPSS统计软件进行单因素方差分析和LSD检验,比较各处理组间三种蛋白表达水平的差异。结果:(1)雄性大鼠各DEHP处理组间AVPV核区ERα蛋白表达水平差异无统计学意义。雌性大鼠各DEHP处理组间AVPV核区ERα蛋白表达水平差异有统计学意义,与对照组相比,2 mg/kg DEHP处理组ERα蛋白表达水平降低(P=0.023),10 mg/kg DEHP处理组ERα蛋白表达水平有降低的趋势(P=0.052)。(2)雄性大鼠各DEHP处理组间AVPV核区Kisspeptin蛋白表达水平差异无统计学意义。雌性大鼠各DEHP处理组间AVPV核区Kisspeptin蛋白表达水平差异有统计学意义,与对照组相比,2mg/kg DEHP处理组Kisspeptin蛋白表达水平有降低的趋势(P=0.060),10 mg/kg和50 mg/kg DEHP处理组Kisspeptin蛋白表达水平降低(P=0.012和P=0.040)。(3)雄性和雌性大鼠各DEHP处理组间AVPV核区CYP19蛋白表达水平差异无统计学意义。(4)雄性和雌性大鼠各DEHP处理组间MPN核区ERα蛋白表达水平差异无统计学意义。(5)雄性和雌性大鼠各DEHP处理组间MPN核区CYP19蛋白表达水平差异无统计学意义。结论:(1)出生前DEHP暴露可降低成年后雌性大鼠AVPV核区ERα及Kisspeptin的表达,未发现对成年后雄性大鼠AVPV核区ERα及Kisspeptin表达水平的影响;(2)本研究条件下,未发现出生前DEHP暴露对成年后大鼠AVPV核区CYP19表达的影响;(3)本研究条件下,未发现出生前DEHP暴露对成年后大鼠MPN核区ERα和CYP19表达的影响;(4)出生前DEHP暴露对成年后大鼠AVPV核区ERα及Kisspeptin表达的影响表现为性别差异性,并且对ERα的影响呈现低剂量效应。