目的:本课题研究B-Myb在电离辐射诱导的人脑胶质瘤细胞凋亡以及周期阻滞中的作用及其调控机制。方法:电离辐射处理U87和U251细胞,用western blot和免疫荧光检测细胞中转录因子B-Myb及其磷酸化形式的表达,核质分离实验检测B-Myb在细胞中的分布。流式细胞仪检测细胞周期变化和凋亡,以及cyclin B1、cyclin A、CDK2等周期相关蛋白的表达。转染小干扰RNA降低B-Myb蛋白质的表达之后进行电离辐射处理,检测细胞周期相关蛋白的表达、细胞周期分布以及细胞的凋亡情况。用两种不同的p53突变质粒分别转染p53缺失的H1299细胞,检测其中B-Myb及其磷酸化形式在电离辐射刺激之后的变化。免疫沉淀确定p53与B-Myb之间的相互作用。染色质免疫共沉淀探索SP1在B-Myb启动子上的结合情况。利用western blot和免疫组织化学探究临床人脑胶质瘤样本中p53基因状态与B-Myb表达之间的关系。结果:本研究发现1)电离辐射诱导U251细胞中转录因子B-Myb及p-B-Myb的表达增加。2)在U251细胞中,B-Myb在电离辐射诱导的G2/M期阻滞以及细胞周期相关蛋白的变化中起一定作用。抑制B-Myb表达可以增加U251对电离辐射的敏感性,而对U87没有较大影响。3)B-Myb在电离辐射后的增加可能与突变p53相关。4)p53和SP1通过不同的途径调控B-Myb的表达。5)临床人脑胶质瘤样本中,B-Myb和p-B-Myb及周期相关蛋白在携带突变p53的样本中高表达。结论:携带不同p53基因的细胞对电离辐射刺激会产生不同的细胞周期变化,转录因子B-Myb在其中起一定作用,而p53和SP1参与调控B-Myb的表达。