慢性胰腺炎（Chronic pancreatitis,CP）是一种渐进式的外分泌腺炎症性疾病,胰腺的实质部分被破坏并逐步被纤维组织所取代,最终会导致腺体不可逆转的损伤。如果病情持续扩散,则会导致内分泌腺和外分泌腺同时发生功能性衰竭。已有大量研究证明,CP患者的肠道菌群与正常人群存在一定程度上的差异,复合益生菌制剂干预CP可以缓解病情。阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila,A.muciniphila）是目前备受瞩目的下一代益生菌,已被证实对于肥胖及二型糖尿病具有保护作用,且使用巴氏灭活后的菌制剂可以复制这种有益作用。课题组近期工作发现,外源给予小鼠短链脂肪酸（Short-chain fatty acids,SCFAs）可减轻CP发病症状、缓解CP发病进程。作为SCFAs生产菌,A.muciniphila是否对CP具有潜在调节作用尚不清楚。因此,本文使用雨蛙素建立小鼠CP疾病模型,使用A.muciniphila标准菌株ATCC BAA-835,探究A.muciniphila对小鼠CP模型的缓解作用及潜在机制。随机将8周龄的雄性C57BL/6J分成4组,每组7-10只,分别为对照组、模型组、AKK活菌干预组、AKK灭活菌干预组。通过反复腹腔注射雨蛙素（50μg/kg）建立小鼠CP模型。造模期间AKK活菌干预组小鼠每日灌胃200μL的5×109 CFU/m L的A.muciniphila活菌菌液,AKK灭活菌干预组将A.muciniphila菌液经70°C,30 min巴氏灭活处理后,再通过灌胃给予小鼠。通过检测小鼠胰腺萎缩情况,胰腺的重量与体重比值、胰腺纤维化程度及细胞因子、巨噬细胞的基因表达水平,鉴定A.muciniphila活菌制剂以及灭活菌制剂对小鼠CP发生的胰腺损伤是否具有保护作用。通过检测小鼠血清里的脂多糖的含量及FITC-Dextran表征肠道通透性。使用免疫荧光对小鼠结肠中的二型黏蛋白（Muc2）进行荧光染色标记。使用蛋白免疫印迹法检测结肠组织中紧密连接蛋白ZO-2、Occludin、Claudin-1的蛋白表达量,鉴定A.muciniphila活菌制剂以及灭活菌制剂干预对小鼠肠道屏障是否具有保护作用。采用16S DNA扩增子测序方法对小鼠肠道菌群组成进行分析。同时检测小鼠胰腺、血清和结肠中SCFAs含量,以及胰腺、结肠组织中组蛋白去乙酰化酶（Histone deacetylases,HDACs）、G蛋白偶联受体（G-protein-coupled receptors,GPCRs）中的SCFAs受体GPR41、GPR43和GPR109A以及MAPK/NF-κB炎症信号通路的相关蛋白表达情况,探究A.muciniphila干预在CP中的潜在作用机制。实验结果表明,A.muciniphila活菌及灭活菌制剂干预均可以有效缓解小鼠CP。具体表现为:小鼠胰腺萎缩程度显著降低,胰腺炎症因子水平显著下调、巨噬细胞浸润程度显著下降,胰腺纤维化水平显著降低,CP导致的胰腺损伤明显减轻。同时,A.muciniphila活菌及灭活菌制剂均干预能够显著降低肠道通透性,增加结肠中Muc2的分泌。活菌干预后小鼠结肠紧密连接蛋白ZO-2、Occludin和Claudin-1的表达显著上升。此外,A.muciniphila活菌干预后恢复CP肠道菌群稳态,在属水平上增加可以产生SCFAs的菌的相对丰度。以此增加小鼠结肠、血清和胰腺中SCFAs含量。抑制胰腺和结肠中HDAC1表达且激活GPR41和GPR43的表达。此外,A.muciniphila在胰腺组织中抑制MAPK（p38,JNK）/NF-κB炎症信号通路的激活。综上,A.muciniphila活菌干预后显著增加了肠道代谢物SCFAs在结肠中的浓度,并通过外周血迁移至胰腺中,进而增加了SCFAs对HDAC1的抑制作用并激活GPR41和GPR43,最终缓解小鼠CP的进程。灭活菌干预也具有一定的效果,后续将继续探究灭活菌发挥作用的机制。A.muciniphila活菌本研究首次证实了A.muciniphila干预对小鼠CP具有保护作用,为以后研究益生菌及益生元在胰腺类疾病中的作用提供新的思路,也为临床治疗CP提供新的方向。