大豆磷脂酰胆碱的提取纯化研究

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磷脂酰胆碱(PC),是一种磷脂,具有特殊的理化性质和生理功效,广泛应用于食品、医药、化妆品等领域,尤其在作医药乳化剂和脂质体制备方面具有广阔的前景。目前国内所需求的高纯卵磷脂主要依赖进口。而我国大豆资源丰富,利用制油工业的附产物-大豆磷脂制备高纯PC,成本低廉,附加值高,是大豆磷脂深加工的发展方向。 为了制备高纯度磷脂酰胆碱,本文以浓缩大豆粗磷脂为原料,采用丙酮和超临界CO2萃取两种方法脱油,得到粉末磷脂,并比较了其质量。在萃取压力30MPa,萃取温度50℃,萃取时间2h,流量30L/h的条件下,用超临界CO2萃取使丙酮不溶物(即粗磷脂的含量)由65.3%提高到98.3%,其PC的含量为20.6%;在丙酮用量200ml、萃取时间15min、萃取温度40℃用丙酮脱油使丙酮不溶物的含量达到97.6%,其PC的含量为20.1%。 用乙醇提取富集PC,考察了乙醇浓度、固液比、温度、时间、抽提次数对PC含量和提取率的影响;并用1645正交表进行条件优化,结果表明:影响PC含量和提取率的主要因素是温度和乙醇浓度,最佳条件为乙醇浓度95%,固液比1:20,提取时间30min,温度35℃,抽提次数2次,PC含量提高到45.1%,提取率达62.0%,得到初步的富集。 通过柱层析进一步纯化,采用中性氧化铝作吸附剂,对洗脱剂、洗脱方式、加样量和流量进行了研究;经过研究摸索,确定加样量(样品质量/吸附剂质量)为2.5%,流速3ml/min,以酸性氯仿-甲醇混合体系进行梯度洗脱,收集含有单一PC的馏分,经浓缩干燥,最终得到微黄色的卵磷脂产品。通过薄层层析和红外光谱鉴定分析,纯度为95.1%,其收率为86.6%。
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