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目的:采用酶解超滤方法提取鹿角多肽,考察鹿角多肽对大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)活性的影响,从而为应用鹿角多肽构建细胞支架打下实验基础。方法:(1)精制鹿角,选取四种酶分别进行酶解,进行定性分析和氨基酸分析。(2)采用星点设计-效应面法优化制备鹿角多肽,以酶用量、底物浓度、温度为自变量,多肽含量峰面积为因变量,分别进行多元线性回归和二项式方程拟合,结合最佳数学模型描绘效应面,确定最佳工艺并进行验证试验。(3)采用超滤提取分子量(800-1500)鹿角多肽;无菌条件下培养传代BMSCs;筛选最佳浓度;考察最佳浓度鹿角多肽对BMSCs增殖、生长周期、碱性磷酸酶(ALP)的影响。结果:(1)采用TLC法检测鹿角胶,检测结果符合药典相关标准;采用胃蛋白酶酶解鹿角胶,可以得到分子量在800-1500鹿角多肽;该鹿角多肽溶液的氨基酸浓度为21.025μmol/m L。(2)星点设计-效应面法优选出的最佳工艺条件为酶用量4.0%、底物浓度6%、温度40℃,最佳工艺验证试验结果,与二项式拟合方程预测值偏差为1.41%,最佳工艺具有科学规范性。(3)超滤提取得到分子量800-1500的鹿角多肽;BMSCs生长良好;当鹿角多肽(分子量800-1500)浓度为1.261×10-1g/m L时,细胞增殖率45.84%,促进细胞增殖效果明显优于其余各浓度样品;鹿角多肽(分子量为800-1500)组可明显增加大鼠骨髓间充质干细胞的ALP值,与空白组比较具有极其显著性差异(P<0.001);流式细胞仪检测显示,鹿角多肽组(分子量800-1500)对成骨细胞的增殖指数为38.68%,明显优于其他各组。结论:采用胃蛋白酶酶解鹿角胶的效果明显优于其他三种酶;采用星点设计-效应面法优化制备的鹿角多肽,结果相对稳定,可预测性较强,方法简便合理;鹿角多肽(分子量800-1500、浓度1.261×10-1g/m L)对BMSCs具有促成骨化作用。