目的：脑出血是一种严重危害人类健康的疾病，脑水肿形成是导致脑出血病情恶化的主要因素之一。脑出血后脑水肿形成的机制是一个十分复杂的过程，迄今为止，尚未完全阐明。水通道蛋白(qauaporin，AQP)是影响水跨膜转运和调节细胞内外环境平衡的膜蛋白，水通道蛋白4(AQP4)是水通道蛋白家族中的一员。近年来研究结果显示，AQP4在正常大脑和多种病理情况下水转运过程中发挥重要作用，尤其在脑水肿的发生发展及恢复阶段扮演重要角色，日渐成为脑水肿形成机制的研究热点。最新研究表明 AQP4参与神经系统疾病脑水肿的形成，并在脑水肿的产生和发展过程中起重要作用。　　本实验通过建立大鼠实验性脑出血模型，采用免疫组织化学法、干湿重法分别检测脑出血后血肿周围不同时间点AQP4的表达及脑组织含水量的动态变化，探讨AOP4在脑出血损伤过程中表达的变化规律及其与脑水肿脑损伤的相关性，以及逐瘀安脑颗粒的干预作用，研究脑水肿的发生机制，探索有效的防治办法。　　方法：　　(1)实验动物和分组健康成年Wistar大鼠，共100只，麻醉意外死亡10只，造模昏迷弃用5只，造模成功大85只，体重250～350g，雌雄不限，SPF级（广西药品检验所实验动物中心提供，许可证号SCXK桂2003-0001）。以标准饲料喂养。将造模成功85只大鼠随机分成五组：即假手术组5只，对照组、逐瘀安脑颗粒小剂量组、逐瘀安脑颗粒大剂量组、尼莫地平组，每组按造模后6h、1d、3d和7d时间点分成4个亚组，每个亚组各5只大鼠(n=5)。　　(2)脑出血模型制作及成功标志　　大鼠经5％戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉后，俯卧位固定于立体定位仪上，距尾尖0.5cm处剪尾，取50μl血，待其呈半凝状态，用16号针头由钻孔刺入6mm（即右侧尾状核部位）将半凝血缓慢注入，留针10min。动物麻醉清醒后，参照Longa法评分标准，1～3分的大鼠入选本实验，不够标准者抛弃，重新制模补充入组。　　(3)组织切片的制备　　动物断头取脑后，以针道为中心冠状面切取血肿周围2 mm厚的脑片。石蜡包埋，片厚4μm，进行HE染色和免疫组化检测；　　(4)AQP4的检测　　切片经H2O2孵育10min；羊血清室温孵育10min；一抗为兔抗大鼠AQP4(1:200)，37℃孵育2h；SP试剂盒按说明书操作；DAB显色，镜下控制；阴性对照用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗进行孵育。　　(5)AQP4免疫组化图像分析　　每只大鼠共染色6张切片，AQP4免疫组化的每张切片选取5个区域进行观察，图像分析系统进行定量分析，分析项目是阳性区面积百分比。　　(6)脑组织含水量的测定　　采用干湿重法测定脑组织含水量，动物断头取脑后，将各时间点的前半脑组织分别用电子分析天平称重(湿重)，然后臵入95℃恒温箱中，24h后取出再称重(干重)。以(湿重-干重)/湿重×100﹪来计算脑含水量，以此代表脑水肿的水平。　　(7)统计学分析　　实验结果以均数±标准差(x±s)表示，用SPSS13.0进行统计处理。采用方差分析和q检验进行分析，p<0.05为差异有统计学意义。　　结果：　　(1)血肿周围脑组织形态学的改变组织切片HE染色可见脑出血后6h血肿周围神经细胞胞体肿胀，1-3d表现最明显，细胞变形坏死，核固缩、碎裂、溶解，胞浆红染明显加深。7d后，细胞肿胀减轻，有少量胶质细胞增生。AQP4主要在血肿周围的星形胶质细胞表达，血管周围也呈明显的阳性表达。AQP4阳性反应产物主要表达在细胞膜上，强阳性时胞浆可有表达，细胞核不表达。光镜下：胞膜及胞浆显示棕黄色。　　(2)AQP4的动态变化　　与假手术组相比，对照组、尼莫地平组、逐瘀安脑颗粒组均从脑出血后6h血肿周围水肿区的神经细胞AQP4阳性表达明显增加(P<0.05)，3d达到高峰(P<0.01)，7d后仍强于正常。　　(3)脑组织含水量的变化　　与假手术组相比，对照组，尼莫地平组、逐瘀安脑颗粒组脑组织含水量均在出血后6h增加(P<0.05)，3d达到峰值(P<0.01)，7d明显减轻，(P<0.05)。且逐瘀安脑颗粒组、尼莫地平组脑水肿低于对照组(P<0.05)。　　(4)AQP4与脑组织含水量之间的相关性　　在各时间点脑水肿程度与AQP4表达的变化呈显著正相关，6h时(r=0.920，P<0.05)，1d时(r=0.952，P<0.05)，3d时(r=0.993，P<0.01)，7d时(r=0.947，P<0.05)。　　结论：　　(1)脑出血后血肿周围AQP4的表达与脑组织含水量之间呈正相关；　　(2)脑出血后血肿周围AQP4的动态变化规律提示AQP4的表达与脑水肿、脑损伤的发生发展密切相关，是引起出血性脑水肿脑损伤的重要因素之一；　　(3)脑出血后AQP4表达明显增加，提示AQP4参与了脑水肿的发生发展过程，而逐瘀安脑颗粒可能通过抑制 AQP4的表达减轻脑出血后脑水肿的形成。