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目前国内少有的一些研究表明人主要感染人隐孢子虫(Cryptosporidium hominis),但C. hominis群体遗传结构尚不清楚,从而不能推断人隐孢子虫病的感染来源和传播机制。本课题对开封地区人源隐孢子虫分离株以基于SSU rRNA基因的PCR-RFLP方法为主要工具进行种类和基因型鉴定、以GP60基因位点进行亚型分析,从而解析C. hominis群体遗传结构,初步总结出人隐孢子虫病的流行规律和传播机制。并用C. hominis不同亚型分离株感染蒙古沙鼠、新生仔猪和羔羊,观察其临床症状和病理变化,从而研究不同亚型之间的生物学差异。同时对国内主要C. hominis和微小隐孢子虫(C. parvum)基因亚型进行致病性研究,了解国内医学上主要隐孢子虫种生物学特性,以期为隐孢子虫公共卫生安全屏障的建立起到有效推动作用。开封是国家精品旅游城市,以其独特的旅游资源和深厚的旅游文化,每年接纳数亿海内外游客,人员流动性大,有利于机会性人兽共患寄生虫传播流行。为了解开封地区临床病人隐孢子虫感染状况,用饱和蔗糖溶液漂浮法、甲醛-乙酸乙酯-改良抗酸染色法对该地区门诊和住院病人6 093份粪便样品进行了检查。结果检出隐孢子虫感染率为0.1%,秋季为感染高峰期,6岁以下儿童感染率较高。所有分离株均为C. hominis,Ib亚型家族占5/6,Ia亚型家族1/6。研究表明开封地区临床病人隐孢子虫感染率较低,但仍应进一步开展健康教育,普及卫生知识,提高自我保健意识和自我保健能力,预防食源性寄生虫病的发生和流行。目前国内一些研究表明人主要感染人隐孢子虫(Cryptosporidium hominis),但已获取且传代保存的国内C. hominis分离株较少,C. hominis生物学特性研究未见报道。在本试验自感染前第10d起,采用胃导管灌服地塞米松抑制蒙古沙鼠(Meiiones Unguiculataus)免疫力直至排卵囊结束后14d,对国内C. hominis Ib亚型分离株进行生物学特性研究。结果显示,感染后3d,感染组有卵囊排出,感染后第6d出现高峰期,此后逐渐下降直至感染后10或11d排卵囊结束。感染前后基于18S rRNA和gp60基因分析,表明遗传学无差异。建立了持续稳定的C. hominis Ib亚型分离株啮齿动物模型,为C. hominis卵囊扩增和进一步研究其生物学特性等提供了重要的参考依据。为了寻求更为经济有效的C. parvum卵囊保种传代方法,将19日龄蒙古沙鼠随机分成5组,免疫抑制对照组和感染组采用胃导管灌服地塞米松0.80mg·只-1·2d-1,10d后,感染组沙鼠灌胃接种C. parvum卵囊,对排卵囊规律,临床表现及组织学和超微结构进行了观察。结果感染后第2d有卵囊排除,显露期OPG值近似于犊牛实验,且持续时间较犊牛感染长,为C. parvum卵囊保种传代提供了更为经济的实验方法。为了初步确定人隐孢子虫同一亚型家族内不同亚型是否存在生物学表型差异,用分离自开封地区某医院的C. hominis分离株ZZH-1 (IbA20G2)和WJH-35 (IbA19G2)感染新断奶蒙古沙鼠,3日龄羔羊和仔猪;通过比较感染后动物的临床症状、虫体寄生部位、寄生量和病理变化并测定感染动物的排卵囊规律、体重变化等一系列指标来初步确证不同亚型人隐孢子虫致病性差异。研究结果显示,不同亚型人隐孢子虫的致病作用存在一定差异,为下一步隐孢子虫毒理的深入研究奠定了理论基础。为了研究人隐孢子虫(Cryptosporidium hominis IbA19G2)和微小隐孢子虫(C. parvum IIdA19G1)对新生仔猪的致病性差异。将3日龄新生仔猪随机分为三组,经口感染不同基因型隐孢子虫,对排卵囊规律,临床表现及病理变化进行观察。结果C. hominis感染后潜隐期和显露期均较C. parvum长,显露期C. parvum平均OPG值大于C. hominis,感染后仔猪体重变化存在统计学差异,C. hominis对体重影响较为严重。表明两虫株对新生仔猪致病性存在差异。