活性维生素D在小鼠结肠炎治疗中的作用机制研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:myd1977
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
流行病学研究显示低血清维生素D水平与炎症性肠病(IBD)患者的发病率,疾病严重程度和不良预后有关,但是其机制不明。肠道屏障功能异常在IBD的发病机理中扮演着一个关键的角色,大量内毒素和(或)病原微生物等经受损肠黏膜进入体循环,通过多种机制增加肠通透性,诱发和加重肠道炎症。此次研究的目的是利用DSS诱导的急性结肠炎小鼠模型,探讨活性维生素D[1,25(OH)2D3]通过修复肠上皮屏障缓解结肠炎的机制。为了明确1,25(OH)2D3能够改善和减轻DSS诱导的小鼠急性结肠炎症。将8-10周的C57BL/6野生型小鼠进行2.5%DSS诱导的急性结肠炎造模实验,分别设置为对照组(Ctr1组)、模型组(DSS组)和治疗组(DSS+VD组),给予不同处理。模型组小鼠每天给予0.05%乙醇PBS溶液(10ul/g),治疗组小鼠每天给予1,25(OH)2D3(0.5ug/kg)处理,均为腹腔注射。急性造模期第1-7天,两组均给予2.5%DSS饮水,炎症恢复期第8-10天,两组均换为正常饮水;对照组则全程给予正常饮水。每日测量小鼠体重、饮水量,观察小鼠粪便性状以及隐血程度。结果显示:1,25(OH)2D3能明显缓解DSS诱导的小鼠结肠炎症状,包括:DSS+VD组小鼠结肠长度长于DSS组,而体重(body weight,BW)降低程度,DAI评分(disease activity index)以及病理学评分明显低于对照组。同时,1,25(OH)2D3处理可以明显降低结肠组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,炎症细胞浸润,促炎性细胞因子(如IL1-α、IL6、IL8等)表达,以及提高抗炎因子IL10的表达。这些提示我们1,25(OH)2D3确有缓解和治疗DSS诱导的小鼠炎症性肠炎的作用。Claudin家族是紧密连接蛋白的重要组成,具有决定紧密连接通透性的作用。有研究表明临床IBD病人结肠组织中Claudin4表达明显降低。为了进一步明确1,25(OH)2D3是否可以调控Claudins,我们通过Western blot、IHC以及组织免疫荧光实验检测DSS诱导的小鼠结肠组织中的连接蛋白表达,相比较对照组,1,25(OH)2D3能显著上调紧密连接蛋白Claudin4的表达。为了进一步明确1,25(OH)2D3是否可以通过稳定肠道上皮屏障进而缓解结肠炎的症状,我们通过体内荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(fluorescein isothiocyanate dextran,FITC-D)渗透实验,发现1,25(OH)2D3处理可以明显降低DSS处理的小鼠血浆中FITC-D浓度;另外1,25(OH)2D3处理可以保护DSS对杯状细胞的损伤。同时我们也发现DSS+VD组小鼠结肠组织连接蛋白(Claudin4,Occludin)的表达明显增加。另外利用Caco-2单层细胞建立体外DSS诱导模型,通过检测单层细胞跨膜电阻(electrical resistance,TEER)值我们发现,1,25(OH)2D3可以明显提高DSS诱导后的TEER值,并且恢复Claudin4的表达。这些结果提示我们1,25(OH)2D3可以通过促进连接蛋白的表达提高肠道上皮细胞的屏障作用,进而缓解结肠炎症。VDR作为1,25(OH)2D3的核受体,可以结合下游基因启动子区域的VDRE序列调控基因的转录表达,在此基础上我们经过生物信息学分析,发现了Claudin4基因的promoter区有VDR的结合位点,提示1,25(OH)2D3可能通过VDR调控Claudin4的表达。另外我们发现VDR高表达质粒可以提高Claudin4的mRNA水平,VDR敲除的小鼠结肠组织中Claudin4的表达明显低于野生型小鼠,进一步提示我们Claudin4可能是VDR的下游靶基因。本研究结果表明在DSS诱导的急性结肠炎小鼠模型中,1,25(OH)2D3能够通过促进紧密连接蛋白如Claudin4的表达,提高肠道上皮屏障作用,修复损伤的肠粘膜,抑制炎症渗透,降低炎症因子IL1-α、IL6、IL8等表达水平,进而缓解结肠炎症状。本研究结果不仅阐述了 1,25(OH)2D3治疗结肠炎症的部分作用机制,而且也为活性维生素D在防治IBD中提供了理论和实验依据。
其他文献
脂肪酸合成是细胞合成代谢的重要过程,该过程将葡萄糖或者其他生物大分子氧化衍生出来的碳源输送到棕榈酸酯和饱和长链脂肪酸(LCFA)中,进一步修饰后,形成更复杂的脂质。乙酰辅
在数据跨境流动限制问题上,各国基于不同的国情和价值观念,采取了不同的规制方式,其中欧盟的《通用数据保护条例》无疑是其中的优秀范本。在这一范本中,欧盟针对数据跨境流动采用了“第三国适当性评估规则”作为常规手段,却引起了一些争议。有反对的声音表示,第三国适当性评估会产生在不同国家之间的差别待遇,违反WTO最惠国待遇原则。而眼下,中国正在酝酿出台自己的个人数据跨境限制法案,网信办公布的最新的《个人信息出
癌症已经成为威胁人类生命的重大疾病之一。传统的癌症治疗手段包括手术、放疗以及化疗。而放/化疗在治疗过程中由于没有针对肿瘤的特异性,其对于机体的副作用尤为明显。近十
目的:虽然国家不断采取大气污染治理措施改善空气质量,但PM2.5目前仍为首要污染物。大量流行病学研究发现PM2.5会引发多种急性健康影响,因此,掌握PM2.5质量浓度的空间分布特
在高校不断扩招的局势下,本科教育质量问题日益突出,而传统的外部教育质量评估已逐渐无法满足社会的需求。大学生作为高等教育的主体,以学生为中心的内部教育质量评估更能顺
近年来,随着人们对自然环境的重视,可再生能源得到了不断地发展,太阳能作为一种清洁能源,其利用也越来越广泛。为使光伏发电实现高效、友好的汇入电力系统网络,从发电源头解决问题,要对并网输入端进行研究。以20KW光伏并网发电系统为研究对象,采用双级式光伏并网发电系统,前级升压电路为逆变器的输入提供稳定的直流电压。后级逆变电路与LCL滤波器相连输出并网交流电。本文主要对太阳能发电最大功率跟踪及逆变器并网稳
西藏地处高海拔地区,环境恶劣,氧气含量稀薄。西藏牛是经西藏本土改良的黄牛品种,对高原低氧恶劣环境具有良好的适应性。三江牛属于长期选育形成的优良地方品种,躯体长,适应
基于物联网的远洋捕捞决策支持系统对增强远洋捕捞船队的统一化管理、提高远洋渔船捕捞作业效率、为远洋渔业提供信息化服务具有重要意义。本研究针对远洋捕捞作业中渔情预报准确率的提升及远洋渔船的调度优化两个决策支持关键环节,分析了当前远洋捕捞业的现状以及存在的问题,通过多源数据融合技术提高大尺度海洋环境数据的分辨率及可用性,并对远洋船队的调度模型进行深入研究,建立了基于物联网的远洋捕捞决策支持系统,并完成了
在高度集成化的电子产品中,半导体产品的组件尺寸是产品性能的保证,当前的主流工艺已经达到数个纳米之内。在纳米尺寸材料中,电子之间的相互作用是一个十分普遍的现象。现在存在一个共识,磁性来源于电子之间的相互耦合作用,但是我们很难将现有的磁性理论统一起来。现有的磁学理论受到这样一个事实的影响,即不同类型的磁性材料需要用不同的模型来描述[1]。为了深入了解自旋相互耦合作用的物理图像,我们首先会以Ni薄膜掺C
目的:通过探讨贝香消瘿方治疗桥本甲状腺炎(气郁痰阻证)的临床疗效性和安全性,为临床治疗桥本病提供新的治疗方法和理论依据。方法:将符合研究标准的60例患者按照就诊时的先后顺序随机分为对照组和治疗组。对照组给予基础治疗;治疗组给予基础治疗+贝香消瘿方内服。总治疗时间为12周。12周后经统计学分析,比较两组患者治疗前后的中医症候积分、甲状腺抗体滴度水平、甲状腺功能及甲状腺彩超等指标的变化。结果:1.从中