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研究背景缺血性脑血管病是一种致死率、致残率较高的临床常见病、多发病,给社会、家庭及个人带来了严重的精神和经济负担,因此采取有效的方法治疗缺血性脑血管病,降低患者的致残程度,提高其生活质量,成为当前医学领域的研究重点。因此,诱导缺血区新生血管的大量形成,改善缺血区脑组织的微循环,增加受累脑组织的血液供应,保护神经元减轻脑组织损伤,成为缺血性脑血管疾病治疗的新途径。神经炎症在缺血再灌注后的作用较为复杂,某些炎症因子如白介素-1β(IL-1β)可表现出神经损伤和神经保护双向作用,如何尽量减少其神经损伤作用而增强其神经保护作用将是一个重要研究课题。研究目的研究IL-1β对大鼠脑微血管内皮细胞缺氧复氧模型的促血管生成作用。研究方法分离纯化BMEC、Ⅷ因子相关抗原(VIIIF-Ag)鉴定,细胞计数法绘制生长曲线、MTT法测定细胞活力。(2)MTT法测定不同浓度IL-1β对正常培养状态BMEC活力的影响。(3)纯化的BMEC置于厌氧培养箱培养4h后,再进行复氧,建立缺氧复氧模型。(4)给予IL-1β中和抗体后,观察BMEC自分泌的IL-1β对细胞培养上清液中VEGF、MMP-9蛋白表达的影响。(5)、实验分为正常组、缺氧复氧组、缺氧复氧+IL-1β组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中VEGF、MMP-9蛋白水平变化；实时荧光定量PCR、qRT-PCR)测定细胞VEGF、MMP-9mRNA表达量变化。(6)建立三维细胞培养模型,观察IL-1β对BMEC形成小管样结构的作用。结果(1)获得了纯度较高、数量较多的符合实验要求的BMEC,该细胞在培养第120h时细胞活力最强。(2)MTT结果显示,lng/mlIL-1β在加药后12h能显著降低大鼠BMEC的活力。(3)缺氧4h/复氧72h时,IL-1β组VEGF、MMP-9蛋白表达均高于模型组(P<0.05)。(4)缺氧4h复氧48h,IL-1β组VEGF、 MMP-9mRNA表达量分别是模型组的1.8、2.0倍。(5)缺氧4h复氧72h时,模型组与IL-1β中和抗体组的细胞培养上清液中VEGF、MMP-9蛋白水平均未见明显差异。(6)在缺氧4h复氧72h,IL-1β组的小管样结构明显多于模型组。结论本实验结果表明IL-1β能上调缺氧复氧大鼠BMEC VEGF、MMP-9的表达,从而促进新生血管的形成。