【摘 要】
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蓝藻又称为蓝细菌(cyanobacteria),是一类光合自养型的原核生物,因其独特的性质被广泛应用于分子生物学领域中的研究.该研究以穿梭质粒pPRS-1为出发质粒,其上含有来自织线藻P
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蓝藻又称为蓝细菌(cyanobacteria),是一类光合自养型的原核生物,因其独特的性质被广泛应用于分子生物学领域中的研究.该研究以穿梭质粒pPRS-1为出发质粒,其上含有来自织线藻Plectonemaboryanum的完整的内源小质粒(1.5kb),作为穿梭表达重组质粒在蓝藻中的复制起始位点.通过对5.8kb的pPRS-1改造,得到4.19kb的pPUR,该质粒仍保留了1.5kb蓝藻内源小质粒.然后用HindⅢ酶切质粒pEUTMT<,1>,电泳回收其中含热休克启动子groESL、目的基因UB-Tα<,1>、rbcSpolyA和卡那霉素抗性(Km)基因终止区的4.21kb的片段,分别与pPUR、pPRS-1重组,得到两种穿梭表达重组质粒pPUREUT(8.4kb),pPREUT(10.08kb),大小相差约2kb.通过自然转化单胞蓝藻Synechococcussp.PCC7942,在卡那霉素抗性下筛选,获得具卡那霉素抗性的转化藻株.初步动物实验证明口服转Tα<,1>基因蓝藻可以明显促进小鼠T细胞亚群的分化,提高CD/<,4>CD<,8>的比值,具有Tα<,1>的生物学活性.
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