【摘 要】
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目的:通过观察巴戟天寡糖对去势骨质疏松症大鼠的股骨骨密度及骨微结构、血清骨转换指标及大鼠骨组织中OPG、RANKL表达情况的影响,探讨巴戟天寡糖对绝经后骨质疏松症（Postmenopausal Osteoporosis,PMOP）的防治作用,为在临床上运用巴戟天寡糖临床治疗骨质疏松症提供理论依据。方法:30只3个月龄SD雌性大鼠,按体重用随机数字表随机分为4组:假手术组（Sham Operatio
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目的:通过观察巴戟天寡糖对去势骨质疏松症大鼠的股骨骨密度及骨微结构、血清骨转换指标及大鼠骨组织中OPG、RANKL表达情况的影响,探讨巴戟天寡糖对绝经后骨质疏松症（Postmenopausal Osteoporosis,PMOP）的防治作用,为在临床上运用巴戟天寡糖临床治疗骨质疏松症提供理论依据。方法:30只3个月龄SD雌性大鼠,按体重用随机数字表随机分为4组:假手术组（Sham Operation Group,Sham组）（6只）,模型组（Ovariectomized Group,OVX组）（10只）,阳性对照组（Positive Control Group,P组）（6只）,巴戟天寡糖组（Morinda Officinalis Oligosaccharide Group,MO组）（8只）。适应性喂养一周后,OVX组、P组、MO组采用背侧入路切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松病理模型,Sham组从相同入路切除卵巢周围等量脂肪组织。待大鼠术后伤口愈合进行灌胃给药,按照“人与动物体表面积等效剂量”计算大鼠的灌胃剂量:MO组予巴戟天寡糖25mg/kg·d,P组予阿仑膦酸钠0.5mg/kg·d,Sham组、OVX组予等体积双蒸水。每3天称量体重并记录,根据大鼠体重调整药物的剂量,连续给药8周。8周后10%水合氯醛麻醉大鼠,剖腹后腹主动脉取血并取双侧股骨。运用Micro-CT检测大鼠股骨远端骨密度及骨微结构,采用酶联免疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA法）检测大鼠血清中骨钙素（Osteocalcin,BGP）、Ⅰ型原胶原N-端前肽（Procollagen Type 1 N-terminal propeptide,P1NP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate resistant acid phophatase-5b,TRACP-5b）、Ⅰ型胶原C-末端肽交联（C-terminal Telopeptide of Collagen type1,CTX-1）等血清骨转换标志物,逆转录聚合酶链反应（Reverse TranscriptionPolymerase Chain Reaction,RT-q PCR）测定大鼠股骨头中OPG、RANKL m RNA表达水平,蛋白质印迹法（Western Blot,WB）测定大鼠股骨头中OPG、RANKL蛋白表达水平。结果:1、骨密度及骨微结构参数测定:与Sham组比较,OVX组大鼠骨密度（Bone Mineral Density,BMD）、股骨相对骨体积（Relative Bone Volume,BV/TV）、骨小梁数量（Trabecular Numbers,Tb.N）明显下降（P<0.01）,股骨骨小梁间距（Trabecular Sepaeration,Tb.Sp）、股骨结构模型指数（Structure Model Index,SMI）显著增大（P<0.01）;与OVX组比较,P组、MO组的BMD、BV/TV、Tb.N明显上升（P<0.01）,Tb.Sp、SMI显著减小（P<0.01）。各组间的股骨骨小梁厚度（Trabecular Thickness,Tb.Th）无统计学差异（P>0.05）。2、血清检测:与Sham组相比,OVX组的BGP、P1NP含量均明显下降（P<0.01）,TRACP-5b、CTX-1含量明显上升,血清BGP含量无明显差异;与OVX组相比,MO组血清BGP、P1NP含量显著升高（P<0.01）,血清TRACP-5b、CTX-1含量明显下降（P<0.01）。3、大鼠骨组织OPG、RANKL的mRNA、蛋白表达情况:RT-qPCR测定提示,与OVX组比较,MO组OPG m RNA表达明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）,RANKL m RNA表达明显下降,差异具有统计学意义（P<0.01）,OPG/RANKL比值显著上升并趋于假手术组。WB测定提示,与OVX组比较,MO组OPG蛋白表达量明显升高,RANKL蛋白表达量明显下降。结论:1、巴戟天寡糖能够增加去卵巢骨质疏松大鼠的骨量,改善其骨小梁形态及骨微结构;2、巴戟天寡糖能够改善大鼠的骨代谢平衡情况;3、巴戟天寡糖能够提高OPG表达,抑制RANKL表达,提高OPG/RANKL比值,发挥抗骨质疏松症作用。
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