艾比湖湿地不同植物根际放线菌多样性及多相分类研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:leave2009418
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本文综述了不同环境中的放线菌对人类的贡献及其多相分类研究中所采用的技术方法。本文主要对艾比湖湿地自然保护区典型植物根际土壤的理化特征、放线菌的多样性、可培养放线菌抑菌活性和多相分类进行研究,并分析了放线菌多样性与其环境和对应季节之间的相关性,旨在探讨湿地根际放线菌的生态分布特征、特异性以及潜在菌株的活性价值,从而揭示根际放线菌在湿地生态系统中潜在的生态指示作用。分别于2013年5月(春季)、7月(夏季)和11月(秋季),在艾比湖湿地的精河盐场漫滩区和精河入湖口的鸟岛管护站近湖边,选取具有代表性的3种不同植物群落区(盐节木、芦苇和盐角草群落)作为样地,利用五点采样法收集了植物根际土壤。定量测定了根际土壤的含水量(MC)、电导率(EC)、p H、有机质(OM)、碱解氮(AN)、有效磷(AP)、速效钾(AK)、硝态氮(XN)、铵态氮(AMN)和土壤八大离子等17个理化因子,并对各理化因子与植物类型和采样季节的相关性进行分析,以期为艾比湖湿地荒漠化加剧和湖面面积缩小等方面的修复提供参考。测定结果表明:艾比湖湿地研究区根际土壤水分含量偏低,且与植物类型和季节间差异不显著;p H较高,为典型的盐碱性土壤;电导率较高,且与季节呈显著相关;Na+、Ca2+、Mg2+、SO42-、Cl-等离子含量较高,根际土壤主要为氯化物型和硫酸盐-氯化物型盐渍化土壤;有机质含量和有效磷含量保持在较高水平,而碱解氮、硝态氮和铵态氮含量处于较低水平;速效钾含量整体水平较高,其含量大小的次序为:盐节木根际土壤>芦苇根际土壤>盐角草根际土壤。综上所述,艾比湖湿地根际土壤健康状况呈现出的规律是:芦苇根际>盐角草根际>盐节木根际。为了了解艾比湖湿地3种典型植物根际免培养放线菌多样性和优势菌群组成等随季节的变异情况及其与环境因子之间的相关性,本研究采用PCR-DGGE技术对9个根际土壤样品的放线菌的16Sr DNA序列进行了DGGE电泳条带的多样性分析,并对DGGE凝胶上较亮的条带切胶、测序,系统发育的分析,同时用PCA分析法分析了环境因子与放线菌多样性指数之间的关系,揭示了艾比湖湿地不同根际土壤放线菌随季节的群落动态演替和优势菌群的组成变化状况。研究结果表明:艾比湖湿地不同植物根际、不同季节土壤的放线菌多样性存在明显差异,其中盐角草根际放线菌的多样性最高,芦苇根际次之,盐节木根际最低;在盐节木和芦苇根际土壤中放线菌的多样性为夏季>秋季>春季,而盐角草根际土壤放线菌的多样性随春夏秋季节的变化依次增大。DGGE图谱中共测序22个条带,主要为放线菌亚目、微球菌亚目、弗兰克氏菌亚目、酸微菌亚目、棒杆菌亚目、动孢菌亚目和细菌域的未知类群。Shannon指数与土壤有机质含量、含水量呈显著正相关;与电导率、p H值、速效钾、有效磷和碱解氮等呈负相关。采用稀释涂布法对艾比湖湿地3种植物根际土壤可培养放线菌分离培养,共获得116株放线菌。以3株细菌和5株真菌作为靶标菌,用抑菌圈法初筛发现供试的116株放线菌中具抑菌活性的占42.24%,其中有5株对5种以上靶标菌株的抑菌圈直径>15mm。将这5株放线菌用平板对峙法进行复筛和多相分类研究,并对抑菌较强的菌株N1-30、N2-11和N2-12的发酵条件进行初步优化。结果表明,菌株N1-30、N2-11、N2-12、N3-2和N3-5对4株靶标真菌的平均抑菌率分别为67.23%、69.91%、64.51%、61.61%和61.72%;将菌株N1-30、N2-11、N2-12发酵条件初步优化后,其对4株靶标病原真菌的抑菌率均达到70%以上。对抑菌菌株的培养特征、生理生化和16Sr DNA的序列分析,确定抑菌菌株均属于链霉菌属。
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