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目的:研究miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴在肺腺癌细胞生长中的作用,探讨miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴影响肺腺癌细胞干细胞特性的分子机制,为肺腺癌的诊断和治疗提供新的思路。方法:通过瞬时转染miR-30a mimics,使miR-30a在肺腺癌细胞中高表达,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证转染过表达miR-30a对LDHA mRNA水平的影响;利用蛋白质印迹实验检测在肺腺癌细胞中过表达miR-30a后对LDHA蛋白水平的影响;通过TCGA数据库分析LDHA和HIF-1α在肺腺癌中的表达水平和相关性分析;通过GeneMANIA分析LDHA与HIF-1α蛋白相互作用;通过检测细胞上清液中乳酸含量探究对糖酵解的影响;利用细胞增殖实验、细胞平板克隆形成实验、流式细胞术测凋亡实验研究转染miR-30a mimics、miR-30a inhibitor、siR-LDHA、siR-HIF-1α对肺腺癌细胞增殖生物学特性的影响;利用干细胞抗体芯片技术探讨miR-30a-LDHA-HIF-1α信号轴对肿瘤干细胞标志分子的影响;通过高通量测序技术对转染miR-30a mimics、空白、阴性对照组进行转录组测序,采用生物信息学方法分析差异基因。结果:1.乳酸脱氢酶A(以下简称为LDHA)是miR-30a作用的靶点,过表达的miR-30a可抑制LDHA mRNA和LDHA蛋白的表达;在TCGA数据库中,LDHA和缺氧诱导因子-1α(以下简称HIF-1α)在肺腺癌中的表达量均高于正常组织;LDHA的表达和HIF-1α的表达呈正相关;转染miR-30a mimics、siR-LDHA和siR-HIF-1α均可抑制乳酸产生;转染miR-30a mimics、siR-LDHA和siR-HIF-1α抑制肺腺癌A549细胞的体外增殖,转染miR-30a mimics和siR-LDHA抑制A549细胞的克隆形成,促进A549细胞的凋亡;转染miR-30a mimics、siR-LDHA和siR-HIF-1α可抑制肿瘤干细胞标志分子Oct4和Sox2的表达。2.在肺腺癌A549细胞中,过表达miR-30a可以使ACOT11、KDELC2、CT62、F10、MADCAM1、FGF12、BTBD8基因下调2倍以上;miR-30a可以使EGR4、CYP3A7、ARG1、CFAP73、MYLK2、TVP23A基因上调3倍以上。结论:在肺腺癌中,miR-30a低表达可引起LDHA蛋白表达的升高,调控糖酵解代谢,乳酸生成增加,诱导HIF-1α激活,引起肿瘤干细胞标志分子Oct4、Sox2的上调表达,从而促进肺腺癌细胞的生长。