【摘 要】
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[目的]探讨Pygo2对人肾细胞癌OS-RC-2细胞系成瘤的影响,为体内研究肾癌发病机制及靶向治疗提供工具。[方法]采用人肾癌癌OS-RC-2细胞株,对其细胞中的Pygo2经过一系列不同处理,然
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[目的]探讨Pygo2对人肾细胞癌OS-RC-2细胞系成瘤的影响,为体内研究肾癌发病机制及靶向治疗提供工具。[方法]采用人肾癌癌OS-RC-2细胞株,对其细胞中的Pygo2经过一系列不同处理,然后分组建立裸鼠皮下移植瘤模型。MTT法观察OS-RC-2细胞生长情况。将裸鼠分成四组,每组四只,分别用处理过的四种肾癌细胞悬液,分别为A组:实验对照组GFP(原始细胞)、B组:空白对照组Pygo2scrRNA(植入空白载体)、C组:过表达组Pygo2OE,D组:沉默组Pygo2shRNA(利用基因敲除技术使Pygo2低表达)。将4.0x106肾细胞癌细胞悬液0.2ml种植于裸鼠右前腋窝下。定期观察各组成瘤情况。免疫组化实验测定各组肿瘤组织的侵袭性蛋白(MMP-9、MMP-7和VEGF)表达。[结果]第2天细胞进入对数生长期。A、B、C组成瘤率均为100%,D组成瘤率为75%。Pygo2OE组于第3天可见黄豆粒大小移植瘤,第7天,GFP和Pygo2scrRNA组触及皮下小结,Pygo2shRNA于第10才出现移植瘤。C组的成瘤速度明显优于其他三组(P﹤0.05)。D组的成瘤速度及成瘤率均低于其他组(P﹤0.05)。免疫组化实验研究表明Pygo2shRNA能够显著减少MMP-7和VEGF的表达,与减少MMP-7和VEGF的表达量相比较,Pygo2shRNA不能明显减少MMP-9的表达量。[结论]使用OS-RC-2细胞株对其Pygo2进行干预后成功建立裸鼠模型,且不同分组中成瘤时间,成瘤体积存在差异,这对体内研究肾癌发病及靶向治疗提供理论依据,具有重要的意义。
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