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研究目的：探索c-maf基因在关节软骨细胞中过表达对软骨细胞分化和下游基因表达的影响，进而推测它在骨关节炎发生发展中所起的作用。
研究方法：
取5-6日龄BALB/c小鼠的髋关节和膝关节软骨培养后观察细胞形态，并用免疫组织化学和流式细胞仪方法检测Ⅱ型胶原的表达。利用E Coli DH5 α菌株表达带有c-maf-gfp基因或e3p基因的质粒，转染EcoPack2-293细胞，制备带有c-maf-gfp基因或grp基因的逆转录病毒，分别用离心感染(SPINinfection)的方法转化软骨细胞。24小时后使用流式细胞仪分离被转化和没有被转化的细胞，分别提取mRNA，用实时RT-PCR(Real time RT-PCR)方法测定下游基因的表达。同时分别在24孔板中接种分离后的细胞，培养48小时后用荧光显微镜观察c-maf基因过表达对软骨细胞形态变化的影响。
研究结果：
培养72小时后的原代软骨细胞形态规则，呈椭圆形或多边形，免疫组织化学检测95％以上的细胞表达Ⅱ型胶原。质粒转染EcoPack2-293细胞和逆转录病毒转化软骨细胞的效率分别达到80-90％及50-60％。培养48小时后，荧光显微镜观察c-maf基因过表达的软骨细胞形态不规则，扁平、有多个伪足，而对照组的软骨细胞则仍然保持原代细胞的形态特征。实时RT-PCR检测发现MMP-13和MMP-3在c-maf基因过表达的软骨细胞中表达显著增高，而Co12的表达则明显下降。
研究结论：
利用逆转录病毒安全高效地向软骨细胞导入目标基因，从而建立了体外研究软骨细胞形态和功能的新模型。本研究发现，c-maf基因过表达能够影响软骨细胞的分化，显著上调MMP-13和MMP-3的表达和下调Ⅱ型胶原的表达，与目前己知的骨关节炎患者的软骨细胞的基因表达变化一致，为c-maf基因可能在骨关节炎的发生发展中起调节作用的假设提供了依据。