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目的:本研究通过对食管鳞癌组织中Ezrin蛋白以及CD44v6、E-cadherin、MMp-2蛋白的表达及Ezrin mRNA的检测,探讨Ezrin、CD44v6、E-cadherin、MMP-2与食管鳞癌的发生、分化、浸润、转移的关系;Ezrin的表达与CD44v6、E-cadherin及MMP-2的表达在食管鳞癌中的相关性。方法1应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法检测了45例食管鳞癌组织,21例不典型增生组织,24例正常的食管粘膜上皮组织中Ezrin、CD44v6、E-cadherin及MMP-2蛋白的表达。2应用原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)检测了45例食管鳞癌组织,21例不典型增生组织,24例正常的食管粘膜上皮组织中Ezrin mRNA的表达。3应用流式细胞术对27例食管鳞状细胞癌,10例不典型增生组织,8例正常的食管粘膜上皮组织中的Ezrin蛋白表达进行定量检测。结果1 Ezrin在食管上皮不同病变中的表达1.1免疫组织化学检测采用免疫组织化学技术对45例癌组织、21例不典型增生组织、24例正常组织中Ezrin蛋白的检测结果显示:Ezrin蛋白在癌组织中的表达(73.33%)明显高于不典型增生组织(61.90%)和正常组织(8.33%),三者差别有显著意义(P<0.05);Ezrin蛋白的表达与食管鳞癌组织的分化程度及性别和年龄无相关性(P>0.05);但Ezrin蛋白的表达与淋巴结的转移有关性(P<0.05),有淋巴结转移的癌组织Ezrin蛋白的阳性表达率(85.19%)明显高于无淋巴结转移的癌组织(55.56%),且Ezrin蛋白的表达与癌组织的浸润深度有相关性(P<0.05),有纤维膜浸润的癌组织Ezrin蛋白的阳性表达率(85.71%)明显高于无纤维膜浸润的癌组织(30.00%).1.2原位杂交技术检测采用原位杂交技术检测45例癌组织、21例不典型增生组织、24例正常组织中Ezrin mRNA的表达发现,正常食管粘膜上皮中无Ezrin mRNA的阳性表达,与免疫组织化学检测的结果相一致;Ezrin mRNA在癌组织中的阳性表达率为71.11%、在不典型增生组织中的阳性表达率为42.86%;Ezrin mRNA的表达与癌组织的分化程度及性别和年龄无相关性(p>0.05),而与淋巴结转移有关性(P<0.05),且与癌组织的浸润深度有关性(P<0.05),与免疫组织化学检测的结果一致。1.3流式细胞术检测应用流式细胞术对27例癌组织,10例不典型增生组织,8例正常组织中Ezrin蛋白表达量(FI)检测的结果显示:Ezrin在癌组织中的表达(1.5222±0.1055)、在不典型增生组织中的表达(1.1799±0.1781)明显高于正常组织(1.008±0.2133),三者差别有显著意义(P<0.05);且在有、无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间及有无纤维膜浸润的食管鳞癌组织之间的Ezrin蛋白表达量(FI)均具有明显差异(P<0.05);但Ezrin蛋白的表达量(FI)在高、中、低分化的食管鳞癌组织之间及性别和年龄之间无相关性(P>0.05),此结果与免疫组化检测的结果相一致。2 CD44v6蛋白在食管上皮不同病变中的表达采用免疫组织化学技术对45例癌组织、21例不典型增生组织、24例正常组织中CD44v6蛋白的检测结果显示:CD44v6蛋白在癌组织中的表达率为66.67%,在不典型增生组织中的表达率为80.95%,明显高于正常组织(0%),三者差别有显著意义(P<0.05);且CD44v6蛋白的表达与淋巴结的转移有关(P<0.05),有淋巴结转移的癌组织的CD44v6蛋白的阳性表达率(85.19%)明显高于无淋巴结转移的癌组织(38.89%);但CD44v6蛋白的表达与鳞癌组织的分化程度、浸润深度及性别和年龄之间无相关性(P>0.05)。3 E-cadherin蛋白的表达采用免疫组织化学技术对45例癌组织、21例不典型增生组织、24例正常组织中E-cadherin蛋白的检测结果显示:E-cadherin蛋白在癌组织中的表达率为28.89%,在不典型增生组织中的表达率为71.43%,明显低于正常组织(100%),三者差别有显著意义(P<0.05);E-cadherin蛋白的表达与食管鳞癌组织的分化程度成正相关(P<0.05),分化程度越高,E-cadherin蛋白的阳性表达率越高;且E-cadherin蛋白的表达与淋巴结的转移有关(P<0.05),有淋巴结转移的癌组织的E-cadherin蛋白的阳性表达率(7.41%)明显低于无淋巴结转移的癌组织(61.11%);但E-cadherin蛋白的表达与癌组织的浸润深度及性别和年龄之间无相关性(P>0.05)。4 MMP-2蛋白的表达采用免疫组织化学技术对45例癌组织、21例不典型增生组织、24例正常组织中MMP-2蛋白的检测结果显示:MMP-2蛋白在癌组织中的表达率为40.00%,在不典型增生组织中的表达率为38.10%,明显高于正常组织(4.17%),三者差别有显著意义(P<0.05);MMP-2蛋白的表达与食管鳞癌组织的分化程度成正相关(P<0.05),分化程度越高,MMP-2蛋白的阳性表达率越高;且MMP-2蛋白的表达与淋巴结的转移有关(P<0.05),有淋巴结转移的癌组织的MMP-2蛋白的阳性表达率(55.56%)明显高于无淋巴结转移的癌组织(16.67%);且MMP-2蛋白的表达与癌组织的浸润深度有关(P<0.05),有纤维膜浸润的癌组织MMP-2蛋白的阳性表达率(48.57%)明显高于无纤维膜浸润的癌组织(10.00%)。但MMP-2蛋白的表达与患者的性别和年龄无相关性(P>0.05)。5 Ezrin与CD44v6、E-cadherin、MMP-2之间的相关性分析Ezrin蛋白的表达与CD44v6蛋白的表达之间成正相关(X2=4.602,p<0.05);与E-cadherin蛋白的表达之间成负相关(X2=6.905,P<0.05);与MMP-2蛋白的表达之间无明显相关关系(X2=3.712,P >0.05)。7 CD44v6与E-cadherin、MMP-2的相关性分析CD44v6蛋白的表达与E-cadherin蛋白的表达之间成负相关(X2=6.544,P<0.05);与MMP-2蛋白的表达之间无明显相关关系(X2=0.416,P >0.05)。8 E-cadherin与MMP-2的相关性分析E-cadherin蛋白的表达与MMP-2蛋白的表达之间成负相关(X2=4.615,P <0.05)。结论1 Ezrin蛋白及mRNA水平在食管鳞癌组织及不典型增生组织中的表达均高于正常组织;在有淋巴结转移的食管癌组织中的阳性率高于无淋巴结转移组,提示Ezrin蛋白的高表达可能与食管癌的发生及转移有关。2 CD44v6蛋白在食管鳞癌组织及不典型增生组织中的表达均高于正常组织;在有淋巴结转移的食管癌组织中表达的阳性率高于无淋巴结转移组,提示CD44v6蛋白的高表达可能与食管癌的发生及转移有关。3 E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织及不典型增生组织中的表达均低于正常组织,在有淋巴结转移的食管癌组织中表达的阳性率低于无淋巴结转移组,提示E-cadherin蛋白的低表达可能与食管癌的发生及转移有关;E-cadherin蛋白的表达与肿瘤的分化程度成正相关,提示E-cadherin蛋白的表达对食管癌恶性程度的评估有一定的参考价值。4 MMP-2蛋白在食管鳞癌组织及不典型增生组织中的表达均高于正常组织,在有淋巴结转移的食管癌组织中表达的阳性率高于无淋巴结转移组,提示MMP-2蛋白的高表达可能与食管癌的发生及转移有关;MMP-2蛋白的表达与肿瘤的分化程度成正相关,提示MMP-2蛋白的表达对食管癌恶性程度的评估有一定的参考价值。5在食管癌中Ezrin蛋白的表达与CD44v6蛋白表达之间成正相关关系,与E-cadherin蛋白表达之间成负相关,说明在食管癌的发生、发展过程中Ezrin与CD44v6可能有正协同作用,与E-cadherin可能有负协同作用,相互抑制在食管癌转移中的作用。6在食管癌中E-cadherin蛋白表达与CD44v6蛋白和MMP-2蛋白表达之间均成负相关关系,说明在食管癌的侵袭、转移过程中E-cadherin与CD44v6和MMP-2可能均有负协同作用。