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流感是由流感病毒引起的急性病毒性呼吸道传染病,传染性强、流行面广、发病率高,严重威胁人类健康。流感病毒肆虐的原因之一是其抗原多变性使人体不能永久免疫。神经氨酸酶(又称唾液酸酶,neuraminidase,NA)抑制剂之前,流感治疗仅限于金刚烷胺/金刚乙胺和病毒疫苗等方法。Colman等在二十世纪八十年代初研究发现流感病毒NA识别和断裂唾液酸糖苷键的活性位点是不变的,而且NA对病毒从感染的宿主细胞中释放新复制的病毒颗粒具有重要的作用。抑制NA可以干扰和阻止病毒的复制,达到治疗流感的目的。因此,以唾液酸(sialic acid,SA)为母体化合物进行NA抑制剂的研究成为抗流感药物研究的热点。目前已经有两种治疗效果较好的药物扎那米韦和奥司他韦上市,他们均属于唾液酸类似物。使用氟原子取代Zanamivir结构中的双键,得到了双氟取代的化合物,其中3位氟有两种构型,处于平伏键的对NA的抑制活性要高于处于直立键的化合物,而且引入F原子后,针对Zanamivir和Oseltamivir的耐药株依然具有良好的活性,但针对正常株活性仍较 Zanamivir和 Oseltamivir低。本课题设想通过在F原子取代Zanamivir的C-7位引入一个-N3的Linker,经过与碳碳三键修饰的多价骨架进行点击反应耦合形成多价缀合物来近一步提高其活性。那么我们的关键问题就是合成这种C-7位有-N3 Linker修饰的双F取代Zanamivir单体的合成。首先,以唾液酸为原料,经羧基甲酯化,全乙酰化,2,3位引入双键并在4位用-NHBoc保护,再经过8,9位选择性保护,7位引入Linker,2,3位引入F后进行4位胍基化,得到目标单体,最后将单体与多价骨架进行Click反应得到多价双F取代Zanamivir的缀合物。课题总共得到9种多价缀合物,进行了 H7N9(VLP)酶水平活性测试,显示,不同价缀合物的活性均优于单体,其中以聚乙烯马来酸酐为骨架的缀合物活性最好,IC50小于 0.54nM。