TGFβ1,CTGF,bFGF和Annexin1在金葡菌致IgAN模型中的检测分析

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:znzlwzkp
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目的:采用含有金黄色葡萄球菌细胞膜抗原决定簇20肽的麦芽糖结合蛋白免疫Balb/c小鼠,重复建立并完善了IgAN动物模型。同时,检测了IgAN模型肾组织的TGFβ1,CTGF,bFGF和Annexin1的表达及相关性,并与以往文献报道中这四种细胞因子在人IgAN中的表达情况做了比较分析。 方法: ①随机选取5周龄清洁级雌性Balb/c小鼠80只,20肽诱导的模型组50只,对照组30只,模型组每两周用含有20肽的麦芽糖结合蛋白与弗氏不完全佐剂混合液进行皮下免疫至21周。 ②动物处死后肾组织进行免疫荧光,光镜,电镜检测,以验证模型是否制作成功。 ③取动物肾组织制成石蜡切片,进行TGFβ1,CTGF,bFGF和Annexin1的免疫组织化学检测(四种一抗均为兔抗鼠多克隆抗体,其中TGFβ1,CTGF以1:150稀释,bFGF和Annexin1以1:100进行稀释)。采用χ2检验,比较四种炎症因子在模型组和各对照组的表达差异。 结果: ①免疫荧光检测:在模型组肾小球中有明显的IgA荧光表达;光镜检测:模型组肾小球系膜细胞显著性增生;电镜检测:增生的系膜区域内可见电子致密沉积物和系膜基质的增生。 ②四种细胞因子均在模型组高表达(在模型组表达的阳性率分别为92%,88%,68%,64%),χ2检验结果显示它们在模型组中的表达率高于其它对照组(P<0.05)。 结论: ①该模型符合人IgAN的发病特点和病理学特点,本次实验改变了免疫诱导方法,并延长了诱导时间,使得模型与人IgAN具有更高的模拟性。 ②FGFβ1,CTGF在IgAN模型组早期高表达,表达率高于bFGF和Annexin1,且四种细胞因子的表达无明显相关性。
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