【摘 要】
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目的:非酒精性脂肪性肝病,也叫做非酒精性脂肪肝（NAFLD）,可加重代谢紊乱,增加相关并发症的发病风险。因此,早期发现NAFLD是避免并发症不良影响的关键。本研究旨在识别micro RNA（miRNA）,以助于对NAFLD的发生发展机制的研究。方法:1.动物实验:采用高脂饮食建立NAFLD大鼠模型。把实验大鼠的肝脏取出,作为本次实验的标本,检测肝组织甘油三酯（TG）含量,然后切取大鼠肝组织并使用H
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目的:非酒精性脂肪性肝病,也叫做非酒精性脂肪肝（NAFLD）,可加重代谢紊乱,增加相关并发症的发病风险。因此,早期发现NAFLD是避免并发症不良影响的关键。本研究旨在识别micro RNA（miRNA）,以助于对NAFLD的发生发展机制的研究。方法:1.动物实验:采用高脂饮食建立NAFLD大鼠模型。把实验大鼠的肝脏取出,作为本次实验的标本,检测肝组织甘油三酯（TG）含量,然后切取大鼠肝组织并使用HE染色和油红O染色观察其组织学改变。使用Quantitative Real-time PCR（q RT-PCR）手段,对大鼠肝脏组织中miR-182、miR-183-5p和miR-96-5p的表达水平进行检测。2.临床实验:在研究对象的选择上,选取生活习惯正常的健康人群和NAFLD患者进行对比,从河北省人民医院体检中心收集研究对象血清,用q RT-PCR方法检测研究对象血清中miR-182、miR-183-5p和miR-96-5p的表达水平并进行比较。结果:动物实验1.各组实验大鼠的重量、实验大鼠的肝脏湿重、实验大鼠在未进食情况下的血糖数值、大鼠肝脏TG含量的比较高脂组（HFD）大鼠体重、肝湿重高于对照组（ND）（P<0.05）。TG含量在HFD组明显升高（P<0.01）。但两组中的实验鼠未进食情况下的血糖值无明显差异（P<0.05）。2.肝脏组织病理学检测结果比较HE染色:ND组肝组织健康情况良好,没有出现细胞发生炎症情况,也没有出现肝组织内脂肪发生病变。与之相比,HFD组肝脏情况就发生病变,病变肝细胞气球样变肿大,且间质组织中出现均匀一致、没有结构、半透明状态的蛋白质蓄积,肝小叶功能混乱,小叶内也有大量细胞出现炎症。油红O染色:ND组未见明显脂滴积累,HFD组可见大量脂滴积累。3.各组大鼠肝脏miRNA的表达与ND组比,HFD组肝脏中miR-182、miR-183-5p、miR-96-5p表达明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）。临床实验1.基本数据的比较获得了100名符合入选标准的参与者（50名男性,50名女性）的数据。分为对照组（Normal）和非酒精性脂肪肝组（NAFLD）,收集以下指标进行比较:身体体脂指数,也就是常见的BMI指数;舒张压（Diastolic blood pressure,DBP）、收缩压（Systolic blood pressure,SBP）、空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、尿酸（Uric acid,UA）、白蛋白（Albumin,ALB）、球蛋白（Globulin,GLB）、总蛋白（Total protein,TP）、总胆固醇（Total cholesterol,TC）、甘油三酯（Triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（High density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白（Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C）,通过和健康组进行对照比较,可以发现非酒精性脂肪性肝病患者的BMI（P<0.05）、DBP（P<0.05）较高,NAFLD患者的血清中AST（P<0.05）、ALT（P<0.01）、TG（P<0.01）、LDL（P<0.05）、UA（P<0.01）显著升高,HDL（P<0.01）显著降低。2.血清micro RNA测定结果与Normal相比,miR-182在非酒精性脂肪肝患者（NAFLD）的表达明显下降和减少,差异有统计学意义（P<0.01）。与Normal组相比,miR-183-5p在NAFLD组表达明显减少,差异有统计学意义（P<0.01）。与Normal组相比,miR-96-5p在NAFLD组表达明显减少,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:1.高脂高果糖饮食可以诱导大鼠肝脏脂肪变性。2.miR-182、miR-183-5p、miR-96-5p在脂肪肝组的大鼠肝脏中表达显著降低。3.miR-182、miR-183-5p、miR-96-5p在NAFLD患者的血清中表达显著降低,血清中miR-182、miR-183-5p、miR-96-5p可能成为筛查NAFLD新的标志物及潜在的治疗靶点。
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