论文部分内容阅读
第一部分生物信息学方法比较正常及先兆子痫胎盘组织样本的基因表达谱血管发生和广泛的血管生成对于胎盘发育至关重要。先兆子痫(pre-eclampsia,PE)的发生是胎盘血管异常发育的结果之一。在本部分研究中,旨在通过比较正常发育情况下胎盘的基因表达谱及PE发生条件下的胎盘基因表达谱,从中找到在两者中具有共性的特征基因。从Gene Expression Omnibus数据库中下载不同孕龄的正常人胎盘(GSE9984)和先兆子痫人胎盘微阵列数据(GSE6573)的基因表达谱。差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)分析由GE02R进行。基因组富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)使用GSEA v3.0软件进行。TargetScanHuman数据库、miRTarBase数据库及mirRDB数据库用于分析可靠的miR-203作用靶基因。MiR-203与靶标基因的互作网络可视化由Cytoscape构建。比较两组基因表达谱后得到共同基因10个,包括LNPEP、AKNA、SLC9A7、VEGFA、FUT9、STRBP、TMEM144、LPAR6、ERCC6L、TRAP1。通过将表达谱中比较后得到的共同基因与miR-203的靶基因进行比对,发现miR-203与VEGFA之间的作用均存在于PE发生与正常胎盘发育中。第二部分MiR-203通过抑制VEGFA及VEGFR2的表达参与胎盘血管生成胎盘血管生成对维持正常妊娠具有重要意义。然而,这一过程的分子机制尚不清楚。据报道,miR-203在许多肿瘤的发展和进展中起关键作用,但miR-203和胎盘血管生成之间的关系却并未引起相应的关注。本研究旨在通过收集到的人胎盘临床样品及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)来研究 miR-203 与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGFA)/血管内皮生长因子受体 2(vascular endothelial growth factor receptors 2,VEGFR2)之间的相关性。根据孕龄分为早期早产儿(n = 10)胎盘,晚期早产儿(n= 12)胎盘和晚期(n= 18)胎盘,共收集40例。在这项工作中,我们证明了随着孕龄的增长,胎盘中miR-203的表达显着降低,相反,VEGFA和VEGFR2的表达则相应增加。体外实验表明,miR-203的过表达可抑制HUVECs的增殖,迁移,侵袭和管形成,同时下调了 VEGFA和VEGFR2的表达。此外,抑制miR-203的表达表现出对HUVECs明显的促进作用。总之,我们的研究表明,miR-203通过抑制VEGFA和VEGFR2的表达而在调节胎盘血管生成中起重要作用,因此miR-203可能是胎盘血管异常患者的潜在治疗靶点。第三部分MiR-203通过抑制VEGFA的表达促进子痫前期发生先兆子痫(pre eclampsia,PE)是一种发生于妊娠中常见但非常复杂的疾病。据估计,它在世界范围内影响了 3%-8%的妊娠女性。PE的发生及发展是多因素的,如涉及到microRNAs的表达失调。然而,PE发展的确切机制尚不清楚。本研究旨在分析人胎盘中miR-203表达与PE发育之间的关联性。本研究中收集到患有PE者胎盘18例,正常者人胎盘样品20例。研究显示,与正常胎盘样品相比,PE组胎盘中miR-203的表达显着增加,而血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达降低。体外实验表明,miR-203 过表达可显着下调VEGFA的表达,并抑制HTR8/SVneo细胞的增殖,迁移和侵袭能力;而抑制miR-203表达则可减轻这些影响。荧光素酶报告基因检测证实了VEGFA的3’非翻译区与miR-203的相互作用。因此,miR-203可能通过在人胎盘中靶向VEGFA而介导了 PE的发生发展。因此,miR-203可能作为生物标志物或具有治疗PE的潜在靶标。