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目的:第一部分:检测C-MYC在NK/T细胞淋巴瘤(NK/TCL)细胞株中的表达特点,探讨C-MYC在NK/TCL细胞株中的调控机制。第二部分:探讨藤黄酸(GA)对NK/T细胞淋巴瘤细胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8抗肿瘤效应及其可能的机制。方法:第一部分:RT-PCR、Real-time PCR、免疫荧光和蛋白印迹技术测定NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8和健康人NK细胞中C-MYC的表达水平;以BRD4抑制剂JQ1处理NK/TCL细胞株24小时后,CCK-8法检测细胞增殖抑制率;蛋白质免疫印迹技术检测NK/TCL细胞株中BRD4表达水平,并以JQ1和STAT3抑制剂Stattic分别作用于NK/TCL细胞株后,用蛋白质免疫印迹技术检测C-MYC的表达。第二部分:以不同浓度藤黄酸处理NK/TCL细胞株SNK1、SNK-6及SNT-824小时,CCK-8法测定GA对细胞活力影响;Annexin V-FITC/PI流式细胞术和蛋白质免疫印迹技术检测细胞凋亡;用蛋白质免疫印迹技术检测抗凋亡蛋白和信号通路相关蛋白的变化。结果:第一部分:以健康人NK细胞为对照,检测NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8中均存在C-MYC基因和蛋白的高表达。不同浓度(156nM、313nM、625nM和1250nM)BRD4抑制剂JQ1对SNK-1、SNK-6和SNT-8细胞的增殖水平无明显抑制作用。蛋白质免疫印迹法检测NK/TCL存在BRD4过表达。200nM JQ1作用三株细胞24h后C-MYC分别是对照组的91.0±7.6%、98.0±5.2%和93.7±10.8%,其变化均无统计学差异。用STAT3抑制剂Stattic作用于NK/TCL三株细胞后,C-MYC在蛋白水平的表达量较对照组明显下调。表达水平分别为其对照组61.8±3.9%、25.1±4.1%和55.1±1.7%(P<0.05)。第二部分:CCK-8检测结果显示不同浓度藤黄酸(1.0mM、1.5mM和2.5mM)对三株细胞均有显著的增殖抑制作用。三种浓度GA作用SNK-1细胞24 h后的细胞生长抑制率分别为34.1±1.3%、81.8±2.3%和90.0±1.4%,作用SNK-6细胞24h后细胞生长抑制率分别为6.8±3.9%、53.6±1.9%和84.6±1.3%,作用SNT-8细胞24h后细胞生长抑制率分别为42.3±6.0%、78.6±1.3%和94.5±0.8%。其抑制率的变化均有统计学差异。流式细胞术检测结果表明,经GA处理的细胞出现明显凋亡。给药前SNK-1、SNK-6和SNT-8的基础凋亡率分别为6.5±0.4%、7.1±1.4%和7.7±1.7%。GA(1.5mM)作用24h后凋亡率分别为46.1±1.6%、17.5±0.8%和42.9±3.0%,与对照组相比均有统计学意义(P<0.01)。蛋白质免疫印迹技术显示经GA处理的细胞出现Caspase-3和Caspase-9的活化及PARP的剪切,且有Bcl-xl表达下降。在SNK-1和SNT-8中STAT3的磷酸化被显著抑制,在SNK-1和SNK-6中ERK1/2的磷酸化被显著抑制。结论:第一部分:NK/TCL肿瘤细胞株中存在肿瘤特异性的C-MYC过度表达;BRD4对C-MYC无明显调控作用,STAT3参与调控C-MYC在NK/TCL中的表达。第二部分:藤黄酸对NK/TCL细胞株有显著诱导凋亡效应,抗凋亡蛋白Bcl-xl以及JAKs/STATs、MEK/ERK信号通路可能参与了这一过程。