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目的:探讨在自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rat,SHR)主动脉平滑肌中过表达的PKCβ2和PKCθ对丙泊酚血管舒张效应的介导作用。在原代培养的WKY和SHR主动脉血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells,VSMCs)水平,进一步研究PKCβ2和PKCθ介导丙泊酚舒张SHR动脉平滑肌的下游机制。探讨PKCβ2和PKCθ是否也介导了静脉麻醉药依托咪酯、咪达唑仑和右美托咪定对SHR动脉平滑肌的舒张作用。方法:提取原代主动脉VSMCs,western blot比较WKY和SHR的主动脉平滑肌组织和VSMCs中PKCs蛋白表达水平的差异。ELISA检测WKY和SHR的主动脉平滑肌组织和VSMCs中差异表达的PKCβ2和PKCθ的酶活性。将去内皮的主动脉和肠系膜动脉血管环悬挂于离体血管张力测定系统,验证LY333531和PKCθ假底物(PKCqpseudo-substrate inhibitor,PSS)对丙泊酚舒张WKY和SHR动脉平滑肌的影响。Western blot检测丙泊酚对WKY和SHR的主动脉平滑肌组织和VSMCs中PKCβ2和PKCθ磷酸化水平和由细胞浆转运到细胞膜的影响,以及丙泊酚,LY333531和PSS对钙敏感通路蛋白(CPI-17、MYPT和MLC)磷酸化水平、F-actin含量和F-actin/G-actin比例的影响。分别构建针对PKCβ2和PKCθ的短发夹RNAs(Short hairpin RNAs,shRNAs),特异性干扰SHR的VSMCs中PKCβ2和PKCθ的表达,检测CPI-17、MYPT和MLC的磷酸化水平和F-actin/G-actin比例的变化。利用离体血管张力测定系统,比较LY333531或PSS预处理,对于依托咪酯、咪达唑仑和右美托咪定舒张WKY和SHR主动脉和肠系膜动脉平滑肌幅度的影响与丙泊酚有何异同。结果:PKCβ2和PKCθ在SHR主动脉平滑肌组织和VSMCs中蛋白表达及酶活性水平显著高于WKY。LY333531和PSS明显抑制丙泊酚诱导的SHR主动脉和肠系膜动脉平滑肌的舒张幅度,而对WKY的舒张效应却没有显著影响。去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)明显增加WKY和SHR的平滑肌中PKCβ2和PKCθ磷酸化和由细胞浆转运到细胞膜的水平。丙泊酚则显著抑制由NE引起的SHR平滑肌中PKCβ2和PKCθ的激活。然而丙泊酚对WKY的平滑肌中PKCβ2和PKCθ活性没有明显影响。NE显著升高WKY和SHR的VSMCs中CPI-17、MYPT和MLC的磷酸化水平。丙泊酚和LY333531均显著抑制SHR的VSMCs中由NE诱导的CPI-17、MYPT和MLC磷酸化水平的增加。而PSS对SHR的VSMCs中钙敏感活性则无明显影响。NE显著增加WKY和SHR的VSMC中F-actin的含量及F-actin/G-actin比例。丙泊酚,LY333531和PSS均显著抑制SHR的VSMC中肌动蛋白聚合。丙泊酚和shRNA(PKCβ2)均能显著抑制SHR的VSMCs中CPI-17、MYPT和MLC的磷酸化水平,而shRNA(PKCθ)却不能抑制钙敏感活性。丙泊酚、shRNA(PKCβ2)和shRNA(PKCθ)均显著降低SHR的VSMCs中F-actin/G-actin比例。LY333531显著抑制三种静脉麻醉药舒张SHR肠系膜动脉平滑肌的幅度,而只显著抑制依托咪酯和咪达唑仑舒张SHR主动脉平滑肌的幅度。PSS显著抑制依托咪酯和咪达唑仑舒张SHR肠系膜动脉平滑肌的幅度,而对三种静脉麻醉药舒张主动脉平滑肌的幅度均无明显影响。结论:丙泊酚对NE预收缩的WKY和SHR主动脉和肠系膜动脉平滑肌均有舒张作用。丙泊酚对PKCβ2介导的钙敏感通路和肌动蛋白的抑制,至少部分参与了药物舒张SHR动脉平滑肌的效应。另外,丙泊酚对SHR血管的舒张效应也与其抑制PKCθ介导的肌动蛋白聚合有关。静脉麻醉药依托咪酯、咪达唑仑和右美托咪定均能舒张NE预收缩的WKY和SHR的主动脉和肠系膜动脉。PKCβ2介导了依托咪酯、咪达唑仑和右美托咪定对SHR肠系膜动脉的舒张效应,也介导了依托咪酯、咪达唑仑对SHR主动脉的舒张效应。而PKCθ只介导了依托咪酯和咪达唑仑对SHR肠系膜动脉平滑肌的舒张效应。