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随着新材料与技术的发展,生物传感器在检测物质方面的应用越来越广泛。与其他类型的生物传感器相比,荧光生物传感器具有前处理简单、实验操作容易、响应速度快等优势,因此在小分子、蛋白质等生物活性分子的检测方面具有重要的研究价值与科学意义。 本论文主要介绍了荧光生物传感器,DNA-HCR信号放大技术、双模式生物传感器及其凝血酶、抑制乙酰胆碱酯酶农药检测的研究进展等。鉴于此,我们提出了新型荧光生物传感器检测生命物质凝血酶及农药残留中的有机磷农药和氨基甲酸酯类农药。 基于劈裂的两条适配体链修饰的聚A(polyA)与金纳米粒子相结合,再将带有荧光基团的DNA信号探针与其中一条金纳米粒子-劈裂适配体链杂交互补构成基底溶液,当目标物存在时,目标物与金纳米粒子上面的适配体链进行特异性识别并形成特定的二级结构,从而拉近了金纳米粒子之间的距离,溶液的颜色和紫外吸收峰都会有所变化。同时,DNA信号探针会被竞争下来成为游离态,荧光信号增大。因此,我们建立了紫外-荧光双模式信号的改变来进行定量检测凝血酶。该方法得到凝血酶的检测限为0.16nM,此方法还可以改成其他的劈裂适配体链从而检测其他目标物,形成通用型的检测体系。 基于氨基化磁珠与羧基化的DNA通过酰胺反应连接后,再与TriggerDNA通过T-Hg2+-T作用力形成互补双链,磁性分离之后便可将多余的TriggerDNA分离掉以达到减小背景信号的目的。通过乙酰胆碱酯酶与硫代乙酰胆碱生成的胆碱巯基化合物可以将由于T-Hg2+-T作用力连接上的TriggerDNA再次竞争下来形成游离的单链结构,引发HCR反应形成多个G-四联体结构。N-甲基卟啉二丙酸IX(NMM)是一种卟啉物质,本身的荧光信号很弱,但是当NMM嵌插到形成的G-四联体后,会使荧光信号变大。在农药存在时,AChE的活性受到抑制,硫代乙酰胆碱(ATCh)的水解反应产生的巯基的量因此减少,导致释放更少的引发DNA,HCR过程减弱,荧光强度降低。荧光强度的变化与农药浓度有定量关系。选择毒死蜱作为模型分析物来检测该策略的灵敏度,检测限为2.0ng/mL。该方法可用于检测实际样品中有机磷和氨基甲酸酯农药的含量。结果表明,所提出的生物传感策略也表现出良好的抗干扰能力,因此在实际应用中具有巨大潜力。